目的：　　了解上海地区重症急性呼吸道感染（SARI）儿童中人腺病毒（HAdV）的感染状况与生物学特性，对HAdV主要流行株进行病毒分离鉴定与基因组测序，分析其分子生物学及细胞生长特性。　　方法：　　采集2014年2月到2015年8月上海重症急性呼吸道感染（SARI）患儿鼻咽抽吸物（NPAs）样本648份，进行HAdV分型检测及常见15种呼吸道病毒检测。对HAdV主要流行株进行病毒分离及鉴定，设计HAdV-B型全基因组测序通用引物，对分离获得的6株HAdV进行全基因组序列扩增及序列分析。进一步对6株HAdV-B分离株在HeLa、HCT-18、2BS、Hep-2细胞上进行生长曲线测定。　　结果：　　第一部分 HAdV检测分型及感染特征分析　　上海地区（2014.2-2015.8）SARI 儿童648份鼻咽抽吸物样本中，HAdV阳性样本共检出104例，阳性率为16.05%（104/648）。在2014年春夏季HAdV阳性检出率较高（20.5%-26.7%），2014年秋季到2015年夏季HAdV感染率基本持平（10%-11%）。104份HAdV阳性样本中，单独感染47例（47/104，45.19%）。HAdV与其他呼吸道常见病毒存在较高的合并感染率（54.81%），且与人鼻病毒（HRV）合并感染最高（24/104，23.08%）。　　上海地区可检出多种HAdV流行亚型，主要包括HAdV-B7 （ 54.81%， 57/104）、HAdV-B3（29.80%，31/104）、HAdV-C5(3.85%，4/104)、HAdV-C6 （2.88%，3/104）、HAdV-C2(2.88%，3/104)、HAdV-C1（0.96%，1/104）、及HAdV-D53（仅有1例）。　　HAdV-B7为本研究优势亚型，相比HAdV-B3引起的临床症状更为严重，常伴有呼吸困难、喘息等症状（P＜0.05），且HAdV-B7引起重症肺炎的几率是HAdV-B3的2.40倍（40%vs 16.67%，P=0.0272）。　　第二部分 HAdV分离及细胞生物学特性鉴定　　选取人胚肺二倍体细胞（2BS细胞）建立HAdV分离培养体系，对HAdV检测阳性样本进行病毒分离。本研究共成功获得6株HAdV-B型毒株，包括3株HAdV-B3（SH210、SH636、SH3020）与3株HAdV-B7（SH181、SH432、SH3127）。进一步鉴定6株HAdV分离株在Hela、HCT-18、2BS、Hep-2细胞上增殖特性，发现不同HAdV-B型毒株在不同细胞上增殖存在差异，确定2BS、Hep-2细胞为HAdV培养的优势细胞系。　　第三部分 人腺病毒分离株全基因组序列分析　　对6株HAdV-B型分离株进行全基因序列扩增及其进化分析。全基因组分析结果与分型检测结果一致，3株属于HAdV-B3，3株属于HAdV-B7。与已发表的HAdV-B3及HAdV-B7参考株序列同型别间基因组同源性较高（大于99%），仅SH181毒株（HAdV-B7）在DNA 聚合酶/末端蛋白（pTP）处缺失27bp。SH3127毒株（HAdV-B7）在DNA 聚合酶/末端蛋白（pTP）有24bp序列缺失。　　结论：　　人腺病毒（HAdV）是上海地区SARI儿童感染的重要病原，阳性检出率为16.05%（104/648），可检出多种HAdV流行亚型，主要流行HADV-B型（以B3与B7为主）；本研究建立对陈旧呼吸道样本的HAdV分离体系，共成功获得6株HAdV-B型毒株，发现不同HAdV-B型毒株在不同细胞上增殖存在差异。HAdV-B分离毒株全基因组序列分析表明： HAdV-B同型别间基因组同源性较高（大于99%），但发现2个HAdV-B7毒株在DNA 聚合酶/末端蛋白（pTP）处存在基因缺失。本研究为HAdV研究及相应疾病的防控提供了重要科学依据，并可为疫苗以及抗病毒药物研发提供应用工具。