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本研究对五味子木脂素、五味子多糖和五味子红色素的提取纯化进行了综合分析,确定出适合工业化生产的工艺流程。五味子粉末可先经由热水法提取多糖和色素后乙醇回流法提取五味子木脂素,而后各活性组分分别采用大孔树脂进行分离纯化。实验结果表明,这样的实验流程不仅可有效分离色素,提高木脂素成品成色,而且所得木脂素水溶液均一性好,易于大孔树脂吸附解吸,且不易造成堵塞。总体实验流程步骤简便紧凑。具体实验结果如下: 在乳化剂辅助乙醇回流提取五味子木脂素实验中,通过单因素实验,得到最优提取条件:溶剂为乙醇:水:EM(80:20:3,v/v/v)混合液,提取2次,提取时间2h,固液比10:1(v/w),最佳提取量10.71±0.40mg/g五味子,提取率96%。提取液浓缩至干,加水溶解分散,然后分别加石油醚、正己烷、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取比较。结果表明,最佳萃取剂为乙酸乙酯,液液比1:2(v/v),萃取时间20 min。对提取多糖色素后的五味子残渣采用含有乙酸乙酯的乳化剂辅助乙醇回流提取法提取木脂素,正交实验得到最佳提取条件:提取剂为乙醇:水:乙酸乙酯:EM(80:20:10:2,v/v/v/v)混合,提取2次,提取时间2h,固液比10:1(v/w),得到最高提取量为11.32mg/g五味子。 采用AB-8、X-5、SP-207和XAD-4大孔树脂纯化五味子木脂素。通过静态吸附解吸和穿透实验,筛选出SP-207用于五味子木脂素的纯化。采用两种洗脱方法,连续梯度洗脱和逐次梯度洗脱,得到SP-207树脂纯化条件:吸附流速1BV/h,吸附体积3.5BV,洗脱流速2BV/h,采用40%、50%、70%和80%的甲醇水溶液分别洗脱五味子醇甲、醇乙、酯甲和甲素,洗脱体积分别为20、5、5、5BV。 采用硅胶柱层析法纯化五味子木脂素。用薄层层析法筛选展开剂,结果表明石油醚:乙酸乙酯(5:5,v/v)为展开剂分离五味子木脂素,可得到互相分离且清晰的组分斑点。采用硅胶柱层析分离五味子木脂素,混合比例为10:1和5:1(v/v)的石油醚:乙酸乙酯洗脱体系能分离得到五味子醇甲、醇乙和酯甲。 采用热水提取、乙醇沉淀、sevag去蛋白得到五味子粗多糖,并采用离子交换柱进一步纯化,发现五味子多糖由中性和酸性多糖组成,酸性多糖占主要成分,约占总量的1/3。分离出的中性和酸性多糖采用凝胶柱层析法进一步分级分离表明:中性多糖和酸性多糖是由2至3种不同分子量的多糖组成。 研究五味子红色素的光谱特性,发现五味子红色素随酸碱度的调节,颜色有明显变化,并在220~280nm和450~550nm之间有特征吸收峰,这与花色苷类色素特征相似。