针刺对缺氧大鼠骨骼肌HIF-1和MHC亚型的影响

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目的:骨骼肌的速度力量耐力与骨骼肌的纤维类型构成密切相关。低氧可导致HIF-1增加,进而使肌红蛋白,VEGF和糖酵解水平增加,肌肉线粒体和毛细血管密度增加,促进EPO水平及血液携带氧能力增加,提高运动能力。针灸可提高运动成绩。因此本实验拟通过针灸雄性SD大鼠三里和承山穴,观察针刺对骨骼肌纤维HIF-1和MHC类型的影响,以探讨其对骨骼肌生理功能的影响。方法:实验以64只雄性SD大鼠为研究对象,将其随机分为对照组和针灸3天、针灸7天组,针灸14天组。针灸组按《中医学动物实验标准穴位图解》取穴:足三里和承山。方法用圈套缚颈,造成大鼠心率大于400次/分,呼吸大于90次/分,口唇、四肢发绀轻中度缺氧状态(抽血化验大鼠血红蛋白含量大于200g/L作为缺氧指标),以后每次针灸以缚颈呼吸大于90次/分作参照标准。悬吊双下肢,以直径0.3mm、长15mm毫针针刺穴位,每隔3-5min针刺一次,120-140转/min,每次运针30-60秒,留针30min。针刺后分笼饲养,自由饮食,室温18℃,相对湿度50%。各组训练周期结束后行麻醉取材。采用半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定比目鱼肌、趾长伸肌MHC mRNA及HIF-1含量,试剂盒检测比目鱼肌、趾长伸肌MHCmRNA及HIF-1的变化。结果:1、针灸后比目鱼肌MHCⅠmRNA随着针灸天数增加而逐渐减少,而MHCⅡa mRNA的表达则相反。在针灸14天时,比目鱼肌肉MHCⅠmRNA的减少和MHCⅡu mRNA增加与对照组相比有明显差异(P<0.05)。2、针灸后趾长伸肌总MHC mRNA与对照组相比呈现逐渐上升趋势。MHCⅠmRNA所占百分比随着针灸天数增加而逐渐增加,MHCⅡb mRNA所占百分比随着针灸天数增加而逐渐减少,而且在针灸14天时,MHCⅠmRNA的增加和MHCⅡb mRNA或少与对照组相比有明显差异(P<0.05)。3.针灸后HIF-1 RNA在比目鱼肌里表现增加,在趾长伸肌里表现减少,与7天实验组和14天实验组,对照组比较有差异(P<0.05)。4在针刺后7天和14天,大鼠比目鱼肌和趾长伸肌肌内均可清晰见到血管,且针刺组比未针刺组的血管明显增多。正常大鼠趾长伸肌的线粒体数量较多,线粒体嵴明显。对照组针刺7天后线粒体可见,大鼠左侧趾长伸肌线粒体减少,呈空泡样改变,针刺14天肌纤维萎缩变小,线粒体数进一步减少。结论:1.针刺低氧SD大鼠促进骨骼肌的肌纤维型相互转化。这种转变可能是由于针刺引起低氧SD大鼠HIF-1的表达增加,进而改变其能量代谢特点所致。2.针刺低氧训练的雄性SD大鼠可以引起HIF-1的改变。3.针刺低氧SD大鼠能使比目鱼肌MHC mRNA由慢向快的变化,而趾长伸肌MHC mRNA出现由快向慢转化趋势。4.结论中没有电镜的描述
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