鲍曼不动杆菌泛耐药性与外排泵基因和外膜蛋白基因相关性的研究

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目的探讨头孢哌酮-舒巴坦等13种抗菌药物对鲍曼不动杆菌(Acinetobacterbaumannii,AB)的体外抗菌活性,为临床合理用药提供实验依据;了解AB主动外排系统和外膜蛋白基因的表达变化特点,分析其在介导细菌泛耐药中的作用。方法收集苏州大学附属第一医院微生物室分离自临床感染患者的100株非重复AB菌株,全部经法国生物梅里埃公司的VITEKⅡCompact和手工试验重新鉴定确定为AB。第一部分采用K-B法和琼脂二倍稀释法对100株AB进行13种抗菌药物体外抗菌活性的检测,观察AB的耐药状况并分析该组菌的耐药模式。第二部分PCR扩增鲍曼不动杆菌中主动外排系统(AdeABC、AdeIJK)和外膜蛋白(CarO)的基因,通过琼脂糖凝胶电泳观察结果,初步探讨鲍曼不动杆菌临床分离株中外排泵的分布情况;实时荧光定量RT-PCR检测外排泵(AdeABC、AdeIJK)基因的mRNA表达水平,了解外排泵基因的表达情况,分析耐药株和敏感株在基因表达方面的差异。结果第一部分临床常用的抗生素(如头孢他啶、哌拉西林、丁胺卡那、环丙沙星等)作用均较差,米诺环素、多黏菌素B和头孢哌酮-舒巴坦对AB有相对较好的抗菌活性,亚胺培南的作用相对差一些;100株AB中有75株泛耐药株,MIC测定的结果显示米诺环素、多粘菌素B和头孢哌酮-舒巴坦的耐药率分别为88%、59.15%、0%和21.13%,MIC值的几何均数分别为25.16(耐药)、5.85(中介)、1.06(敏感)和29.3(中介)。第二部分敏感和泛耐药两组间adeB基因的PCR及RT-PCR检测结果比较均有统计学意义,而adeJ基因RT-PCR检测两组间无显著差异;98.57%的泛耐药菌株检测到carO基因。结论AB临床分离株的耐药情况严重;米诺环素、多黏菌素B、头孢哌酮-舒巴坦对临床分离的泛耐药AB具有良好的抗菌活性,可作为治疗选择药物,而碳青霉烯类抗生素亚胺培南的抗菌作用较差;AB临床分离株adeB和adeJ基因检出率较高,且adeB基因在AB泛耐药株和少部分敏感株中表达量明显增加;AdeABC、AdeIJK主动外排系统及其基因表达量的增加在AB泛耐药性的形成中具有一定的作用。
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