eEF1A1通过正向调控NOB1的表达促进肝癌细胞的侵袭和转移机制研究

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目的:探讨真核翻译延长因子1A1(Eukaryotic Translation Elongation Factor 1 Alpha1,eEF1A1)调控NIN1/PSMD8结合蛋白同源物(NIN1/PSMD8 Binding Protein 1Homolog,NOB1)的表达对肝癌侵袭转移的影响机制。方法:1、检测多种肝癌细胞系(MHCC97h、HCCLM3、SMMC7721和Hep3B)和正常肝脏细胞HL7702中eEF1A1和NOB1的mRNA和蛋白表达,并分析两者表达的相关性;2、通过Transwell侵袭迁移实验和RTCA实验观察在干扰和上调eEF1A1的表达后肝癌细胞侵袭迁移能力的变化;3、采用实时荧光定量PCR和Western blot实验观察在肝癌细胞中改变eEF1A1的表达后NOB1的mRNA及蛋白表达变化;4、在稳定干扰eEF1A1表达的肝癌细胞株HCCLM3中过表达NOB1,或在过表达eEF1A1的肝癌细胞株MHCC97h中干扰NOB1的表达,实验观察eEF1A1和NOB1蛋白表达水平和细胞侵袭迁移能力。结果:1、肝癌细胞中eEF1A1和NOB1的mRNA和蛋白表达均明显高于正常肝脏细胞;2、在肝癌细胞中干扰和上调eEF1A1的表达后发现肝癌细胞的侵袭迁移能力分别得到的减弱和增强的改变;3、改变肝癌细胞中eEF1A1的表达后发现eEF1A1与NOB1在mRNA和蛋白表达水平均呈正相关;4、eEF1A1依赖于NOB1调节肝癌细胞的侵袭和转移;结论:在肝癌细胞中eEF1A1正向调控NOB1的表达,进而影响肝癌细胞的侵袭和迁移能力。
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