重组水泡性口炎病毒（recombinant vesicular stomatitis virus,rVSV）因其可以高效的表达外源蛋白、在病毒感染时为宿主提供有效的保护以及可以诱发机体产生强的细胞免疫和体液免疫应答等优点而被广泛用于疫苗和肿瘤治疗研究。但是VSV在小鼠中具有神经毒性,且当VSV直接注射到牛和马的脑中时,会引起一些神经系统疾病。因此,野生型的VSV在使用上存在一定的生物安全风险。因此,我们急需对VSV载体疫苗进行改造,以期得到对宿主无致病性或致病性较低的rVSV。VSV的基质蛋白M是一种多功能蛋白,在病毒感染过程中参与宿主转录、核质转运和翻译。野生型VSV的M蛋白可以通过抑制宿主I型干扰素（IFN-α、IFN-β）的表达而抑制宿主的先天性免疫应答,因此,M蛋白与VSV的致病性密切相关。研究表明,M蛋白的第51位甲硫氨酸突变为精氨酸(VSV_M51R)或发生缺失(VSV_?M51)的重组VSV,抑制宿主基因表达的能力降低且致病性减弱。此外,Hoffmann等研究也表明,M蛋白的第221、226位氨基酸位点是两个有潜在致弱功能的氨基酸位点,然而这两个位点在VSV致病性形成上的确切意义,尤其在动物体内还未有详细的探讨和研究。为此,本文针对该病毒基质蛋白M的第221、226位氨基酸进行了定点突变,制备了新型重组VSV。突变位点是第221位缬氨酸（V）突变为苯丙氨酸（F）,第226位丝氨酸（S）突变为精氨酸（R）。利用体外试验和体内试验对新型重组病毒的致病性进行了研究。其中体外实验有:（1）在PC3和PEF细胞中进行的多步生长曲线测定;（2）不同病毒诱导细胞I型干扰素表达;（3）不同M蛋白突变株感染对宿主细胞基因表达抑制效率研究。体内试验中,我们选用BABL/c小鼠来评估不同重组VSV的致病性,主要衡量指标包括接种病毒后,小鼠体重变化、致死率以及小鼠肺和脑组织中病毒载量的测定。体外试验结果表明,相比野生型VSV以及221、226单位点突变VSV,221、226双位点突变重组VSV病毒(VSV_M221,226)的增殖能力显著降低,其致弱效应可能是由于病毒感染有效激活宿主细胞产生I型干扰素所致。在小鼠体内试验中,VSV_M221,226较野生型VSV以及221、226单位点突变VSV致病力明显下降。VSV_M221,226有希望成为一个安全、有效的疫苗载体。