目的:1.回顾性研究产ESBL高毒力肺炎克雷伯菌感染可能的危险因素。2.研究产ESBL高毒力肺炎克雷伯菌可能的耐药机制。3.研究产ESBL高毒力肺炎克雷伯菌分子流行病学。方法:1.菌株来源:收集2016年6月—2017年12月南昌大学一附医院就诊患者分离的KP,同一患者重复分离的菌株只留取患者首次分离的菌株。菌株鉴定和药敏试验采VITEK-2生物分析仪自动鉴定。使用拉丝试验确定高黏液表型特征,使用纸片法试验确认ESBL表型。2.电脑住院系统收集上述细菌感染病人的资料,分别按l:1的比例各收集产ESBL酶hv KP、非产ESBL酶hv KP感染的患者的病历资料,比较患者性别、年龄、血糖、基础疾病、感染前抗菌药物使用情况、侵入性操作及有无手术或重大创伤情况等等,通过上述资料分析感染产ESBL酶hv KP的独立危险因素。3.耐药机制:采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)实验检测产ESBLs菌株中具有耐药基因bla TEM、bla SHV和bla CTX-M的菌株分布情况。4.通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型及MLST分型,参考文献设计引物,采用聚合酶链式反应(PCR)及测序技术,采用BioNumerics软件对PFGE图像和MLST结果进行处理和分析。明确产ESBL高毒力肺炎克雷伯菌分子流行病学。结果:1.从临床分离的1263株肺炎克雷伯菌中筛出高毒力肺炎克雷伯菌株124株,其中K1荚膜血清型阳性85株,K2荚膜血清型阳性39株。在124株高毒力肺炎克雷伯菌中,表型试验显示45株为ESBL阳性hv KP菌株,79株为ESBL阴性hv KP菌株。总体非产ESBL酶hv KP菌感染的患者较产ESBL酶hv KP菌感染患者比例多。2.患糖尿病、侵入性操作、使用碳青霉烯类及喹诺酮类抗菌药物、住院超14天是产ESBL-Hv KP感染的独立危险因素。3.耐药基因检测显示,22株携带bla TEM基因,13株携带bla SHV基因,10株携带有bla CTX-M基因。产ESBL酶hv KP菌对头孢他啶、头孢噻肟、头孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、厄他培南、亚胺培南、美罗培南、左氧氟沙星、环丙沙星、氨苄西林/舒巴坦的耐药率显著高于非产ESBL酶hv KP菌株。4.MLST分型结果显示,产ESBL酶hv KP菌株共45株,其中K1荚膜血清型阳性28株,K2荚膜血清型阳性17株。K1荚膜血清型阳性菌株均为ST23型,而17株K2型产ESBL酶hv KP菌株中10株为ST65型,5株ST86型,2株ST14型。而携带ESBL基因的产ESBL酶hv KP则主要为ST23型、ST65型。结论:1、首先要重视糖尿病患者是否感染产ESBL酶hv KP菌;其次要关注引流、深静脉置管等侵入性操作的规范性及引流时间和碳青霉烯类、喹诺酮类抗菌药物的合理使用。减量缩短住院时间以减少感染机会。2、江西地区高毒力肺炎克雷伯菌中ESBL基因的主要型别为bla SHV-1、bla CTX-M-2和bla TEM-1,具有较严重的耐药性。3、ST分型上ST23型、ST65型占重要比例,PFGE带型表现出高度的同源性,体现出医院感染的预防措施及减少传播的体系至关重要。