四川重楼属植物细胞学及ITS序列研究

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重楼Paris属于藜芦科(Melanthiaceae)重楼组(Parideae)植物,多年生草本,广布于欧亚大陆的热带及温带地区,在我国以西南各省区分布最多。目前发现全世界有28个种,我国分布有22个种,其中四川分布有19种(包括7变种)。该属植物具有清热解毒、消肿止痛、止血等功效,是我国传统的中药材。最新的研究发现,该属植物还具有抗癌的作用。其中P. polyphylla var. chinensis和P. polyphylla var. yunnanensis被中国药典2010版收载,其他种也作为民间中药材。重楼属植物是一类极具开发价值的药用植物。重楼属植物在四川地区资源分布广,种类多。由于种间形态差异小,人们的无意识采挖导致一些还未开发的种濒临灭绝。因此对重楼属植物资源的鉴别、优良品种的选育、野生资源的保护工作已经迫在眉睫。本文通过对12种川产重楼属植物的细胞学及ITS序列分析,旨在探讨重楼属资源种间亲缘关系和种质资源鉴定的方法。研究的主要结果如下:1、核型分析结果表明:12种川产重楼属植物的体细胞染色体数都是2n=10,基数为x=5,均为二倍体2n=2x=10,中期染色体由3对中部着丝粒染色体和2对端部着丝粒染色体或2对近端部着丝粒染色体。川产重楼属植物的核型具有多态性,不同居群在B染色体数量和随体有无上存在差异。P. undulatis核型中发现有primary lesion。2、带型分析结果表明:12种重楼属植物带型的共性体现在较长的端部着丝粒染色体上,这种共性显示了不同种间的亲缘关系。带型的差异性体现在其余染色体带的宽窄和多少上。带型在居群间具有多态性。首次报道了P. undulatis、P. polyphylla var. chinensis、P. marmorata和P. polyphylla var. alba的带型结构。3、采用UPGMA聚类方法,对ITS序列进行分析,结果表明:ITS序列中的522个碱基序列能够有效的将川产重楼属植物12个种区分开,其中,P. undulatis与P. cronquistii、P. polyphylla var. chinensis和P. polyphylla var. yunnanensis、P. polyphylla var. polyphylla与P. axialis和P. thibetica的亲缘关系较近。4、细胞学和ITS序列分析结果表明:采用ITS序列分析,结合Giemsa-C带带型和染色体核型分析,能较好地对重楼属植物进行鉴定,并能反映重楼属植物的亲缘关系。
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