红芪多糖的提取及其抗肿瘤作用的实验研究

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目的从红芪中分离提取红芪多糖,并对其含量进行测定。探讨红芪多糖对人胃癌MGC-803细胞抑制作用及其诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法用水提醇沉法粗提,Sevag法去蛋白,乙醇分级分离,SephadexG-200柱层析纯化红芪多糖,苯酚-硫酸分光光度法测定多糖含量。用MTT法测定红芪多糖对MGC-803细胞的抑制作用,荧光显微镜,电子显微镜,流式细胞仪技术观察和检测细胞凋亡。结果1:提取纯化的是单一均匀的多糖,多糖含量平均结果94.88%,RSD=1.05%。2:1.0-4.0mg/ml的红芪多糖对体外培养的MGC-803细胞有明显的抑制作用,与对照组相比有明显差异(P<0.05),其抑制作用随作用时间和多糖浓度增加而增加,呈时效,量效依赖关系。3:荧光显微镜下凋亡细胞表现为细胞核呈致密浓染,蓝色的细胞核颜色有些发白,有的核染色固缩成高凝集的点状结构,形成凋亡小体。透射电镜下凋亡细胞表现为细胞固缩,核染色质边集,形成新月状体,胞质空泡化,凋亡小体形成等。4:流式细胞仪检测Sub-G1凋亡峰在G1期前出现,G0/G1期细胞比例增高,与对照组相比有明显差异(P<0.05)。结论1:红芪多糖对体外培养MGC-803细胞生长有抑制作用,可能通过阻止细胞周期的进程,诱导肿瘤细胞凋亡。其作用与阻滞细胞周期于G0/G1期有关。2:柱层析法分离多糖可弥补乙醇分级沉淀精确度低的不足,苯酚-硫酸分光光度法方法简便,结果准确,对红芪多糖含量的测定获得满意结果。
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