蜡样芽胞杆菌群微生物在我国部分食品中的分布及其可能来源的初步分析

来源 :中国科学院武汉病毒研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:XFZWY
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蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus,Bc)是一种常见的食品污染菌。该细菌能产生呕吐毒素cereulide及多种肠毒素,导致呕吐和腹泻两种食物中毒,所以也是常见的食源性致病菌。同属蜡样芽胞杆菌群(B. cereus sensu lato)的其它微生物因为与Bc有着高度的同源性,其在食品中的分布及对食品的安全性的影响受到越来越广泛的关注。   根据FDA标准,对武汉市售54个巴氏乳、40个冰淇淋及2个绿茶饮料样品中蜡样芽胞杆菌群菌株进行了检测分析。从这些食品中分离到142株蜡样芽胞杆菌,19株苏云金芽胞杆菌(B.thuringiensis,Bt)以及2株蕈状芽胞杆菌(B.mycoides,Bm)。在巴氏乳、冰淇淋和绿茶饮料中:Bc检出率分别为48.1%、60%和50%,阳性样品中Bc平均含量分别为11.7 CFU/ml、8.27 CFU/g和4 CFU/100ml;而Bt检出率分别为11.1%、2.5%和100%,阳性样品中Bt平均含量分别为4.5 CFU/ml、3.0   CFU/g和9 CFU/100ml。肠毒素基因hbl和nhe在来自巴氏乳的Bc菌株中检出率为37-71.7%,而在Bt菌株中的检出率达到88.9-100%。2株Bm分别来自巴氏乳和冰淇淋,也都携带了部分hbl或nhe肠毒素基因。   分离的19株Bt菌株的血清型多属于H3a3b、H5a5b或H7,所有菌株能在芽胞形成期产生菱形或菱形和方形晶体,除Bt3以外均携带cry1A基因。RAPD和肠毒素基因分析结果表明5株来自巴氏乳和绿茶饮料Bt菌株,通过目前的实验方法无法检测其与Bt商业菌株的区别。推测可能是Bt商业杀虫剂的残留。   采用FDA检测方法和16S rDNA序列分析方法对58个Bc类似菌进行了分类鉴定,结果表明传统生理生化法和16S rDNA序列分析方法的鉴定结果存在一定的差异,传统生理生化鉴定方法的Bc菌株漏检率较高。在此基础上,对冰淇淋样品中分离到的102株Bc进行了生长特性和耐冷型Bc特异性基因检测,比较了耐冷菌株和中温菌株中耐冷型16S rDNA和cspA基因的分布,鉴定出一株韦氏芽胞杆菌菌株BW2-1,该菌株及两株耐冷型标准株表现出明显的冷适应( cold-adaptive)性。而肠毒素基因hbl、nhe和cytK基因在耐冷型和中温型Bc群菌株中的分布没有显著性差异。   采用公猪精子动力抑制分析法和HepG2细胞毒性分析法进行了呕吐毒素cereulide的初步分析,建立了呕吐毒素的生物活性测定方法。结果显示,公猪精子动力抑制分析法具有较高的检测灵敏度,两种方法的检测阈值分别为0.225nM和5.5 nM。Bc菌株的cereulide在对数期末开始合成,其合成与细胞生长及芽胞形成不偶联,不同培养条件对其合成量有较大的影响。同时,采用公猪精子动力分析法和HepG2细胞毒性分析法对从食品中分离的222株蜡样芽胞杆菌群微生物进行了cereulide定性检测,证明来自冰淇淋中的37-3菌株具有cereulide活性。该研究为cereulide的定性和定量检测及其对食品安全的影响提供了技术方法。
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