【摘 要】
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雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)是我国珍贵的药用植物,雷公藤甲素是其主要的活性物质,具有解毒散结、活血化瘀、抗肿瘤、免疫调整、抗生育等多种药理作用。由于具有
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雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook.f.)是我国珍贵的药用植物,雷公藤甲素是其主要的活性物质,具有解毒散结、活血化瘀、抗肿瘤、免疫调整、抗生育等多种药理作用。由于具有广泛的药理活性,加之又是天然生物原料,雷公藤甲素的市场前景十分看好,然而其在雷公藤体内的极低含量,一直制约着该活性物质的推广与应用。研究以一株产甲素内生真菌和宿主雷公藤为对象,采用生物诱导、共生培养、生物转化等方法手段对雷公藤菌植双方互作过程中增强甲素生成的机制进行研究,以探明二者在共生体内各自的甲素生成特征。主要结果如下:1.从健康雷公藤植株体内分离得到22株内生真菌,通过LC初选及LC-MS/MS复筛,筛选得到一株产甲素内生真NS-12,经ITS-rDNA鉴定该菌株与Penicillium Steckii具有99%的相似度。2.将目标菌株回接到雷公藤组培苗中发现,目标菌株不但能够促进雷公藤植株的生长,还能显著提高不同器官内雷公藤甲素的含量以及不同程度地促进雷公藤对营养元素C、N、P、K的吸收。3.不同浓度真菌诱导子对雷公藤悬浮细胞生长和甲素生成的影响为:Y2>G2>Y3>G3>Y1>G1(G1为低浓度菌丝体诱导子30 mg/L,G2为中浓度菌丝体诱导子60 mg/L,G3为高浓度菌丝体诱导子100 mg/L,Y1为低浓度菌液诱导子30 mg/L,Y2为中浓度菌液诱导子60 mg/L,Y3为高浓度菌液诱导子100 mg/L);不同浓度雷公藤诱导子添加对内生真菌生长和甲素生成的影响为:Y3>G3>Y1>G1>G2>Y2(G1为低浓度愈伤诱导子30 mg/L,G2为中浓度愈伤诱导子60 mg/L,G3为高浓度愈伤诱导子100 mg/L,Y1为低浓度愈伤培养液诱导子30 mg/L,Y2为中浓度愈伤培养液诱导子60 mg/L,Y3为高浓度愈伤培养液诱导子100 mg/L)。4.内生真菌与宿主雷公藤的交互生物转化作用表明:愈伤和菌体对培养液的转化作用促进了细胞的生长以及甲素的释放。
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