铁皮石斛快速繁殖技术研究

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铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是兰科石斛属多年生附生草本植物,为我国传统名贵中药材。随着其养生功效越来越受到消费者的认可,铁皮石斛的市场需求日益增大。一直以来铁皮石斛的市场供应大多依靠野生资源,人为的过度采挖加上自然繁殖速度极其缓慢已造成野生铁皮石斛资源濒临灭绝。所以,实现铁皮石斛的人工快速繁殖势在必行。本论文着重对不同铁皮石斛种质通过不同方式人工授粉后的生长情况,以及不同光照和温度条件下的铁皮石斛组织培养进行研究。主要研究结果如下:1.铁皮石斛种质的人工授粉。以4种不同授粉方式(自花授粉、同株异花授粉、种质内异株授粉和种质间异株授粉)对不同铁皮石斛种质进行人工辅助授粉。结果得到:(1)较少铁皮石斛种质(29.73%)能进行自花授粉,且各种质的座果率存在明显差异。授粉成功的种质中,大部分种质的自花授粉和同株异花授粉座果率较低(〈38.46%),种质内异株授粉的座果率较前两者稍高(35.71%-68.42%),但仍明显低于种质间异株授粉的座果率,大部分种质(64.29%)进行种质间异株授粉座果率都能达到100%,且几乎所有种质都能成功进行种质间异株授粉。表明在铁皮石斛种质中广泛存在着自交不亲和的现象。(2)铁皮石斛的果实生长在授粉后120d左右大小略微缩小,然后会随时间延长逐渐脱水直至开裂。铁皮石斛宜在授粉后120d左右采收果实。另外,在铁皮石斛种质中通过不同授粉方式获得的果实大小与其授粉方式未见有明显的相关性。(3)铁皮石斛种质中,通过种质间异株授粉得到的种子的萌发率以及萌发后原球茎的生长发育速度较另3种授粉方式具有明显的优势,种质内异株授粉次之。表明通过种质间异株授粉所产生的后代具有更强的生活力。2.培养条件对铁皮石斛种子萌发的影响。比较不同光照及温度条件下铁皮石斛种子萌发及原球茎发育情况,结果得到:(1)在种胚发育完全及培养基营养丰富的前提下,铁皮石斛种子在播种后6-9d陆续萌发,种子萌发较容易。(2)光照的不同对种子萌发率影响不大,但黑暗条件下的铁皮石斛原球茎不能正常发育,不同光照处理下种子萌发后原球茎都可不同程度发育,各光源下均随着光照强度的增强,原球茎的发育速度加快。(3)温度对种子的萌发具有一定影响,较低温度(25℃)利于铁皮石斛种子的萌发,随着温度的升高,种子萌发率降低。3.培养条件对铁皮石斛组培苗生长的影响。比较不同光照及温度条件下铁皮石斛种质组培苗的生长情况,结果得到:(1)各铁皮石斛种质在各光源下均呈现随着光照强度的增大,组培苗长势渐好的趋势。自然光源较高光照强度下的组培苗生长健壮,LED光源各光照强度下组培苗生长较好,荧光灯光源下组培苗整体长势欠佳。杂交种质在各光源下组培苗的长势较自交种质稳定,而组培苗的长势与移栽成活率有一定的关系。(2)荧光灯光源下的组培苗叶绿素含量显著高于自然光源下组培苗的叶绿素含量,同时也高于LED光源下组培苗的叶绿素含量。(3)自然光源下组培苗叶表皮的气孔长度和宽度在白天明显大于晚上,而在其他两种光源下这种差异不明显,意味着自然光源下铁皮石斛组培苗叶表皮气孔的开闭功能没有完全丧失。(4)自然光源培养室的能耗明显低于荧光灯培养室,培养室空间的大小与其能耗有一定关系,适宜大小的培养室可利于能耗成本的降低。(5)在以自然光为光源的组培条件下,27℃左右的培养温度利于铁皮石斛组培苗的生长,是生长的协调最适温度。
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