赤芝多糖的提取、分离和纯化及其功能活性的研究

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赤芝(Ganoderma lucidum 是中国传统的中药,具有悠久的用药历史。按照中医理论,其具有养心安神,补肺益气,滋肝健脾的功效。传统中医一直用来治疗虚劳体弱,神疲乏力,心悸失眠,头目昏晕,久咳气喘,食少纳呆等症。现代研究表明赤芝子实体含有丰富的生物活性成分,如多糖,三萜类,蛋白质,核苷类、呋喃类衍生物、甾酵类、生物碱类等。具有提高免疫力,抗肿瘤,保护肝脏,对神经系统抑制,降低血压,加强心脏收缩力等功效。其悠久的用药经验及现代学急毒长毒结果表明,其毒性非常低,是一种非常安全有效的中草药。所以,多年来对赤芝各方面的研究一直是关注的热点。本研究从赤芝子实体中,制得赤芝蛋白多糖GLWW,并对其一级结构进行表征并研究筛选其降脂和保肝活性。首先通过除杂,热水浸提,醇沉,透析冻干等工序制得赤芝粗多糖(GL),得率为0.92%,其多糖和蛋白含量分别为65.81%和19.1%。再经过DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析纯化得到GLW多糖,得率为0.08%,多糖和蛋白含量分别为89.25%,11%。GLW多糖含量明显高于蛋白含量,经过纯度鉴定,HPLC分子量测定,单糖分析,傅里叶红外变换及紫外全波长扫描等手段分析其结构,得出结论:GLW的平均分子量为6521Da,主要单糖组成为葡萄糖和甘露糖,由β-糖苷键连接。对GLW蛋白多糖进行保肝和降脂活性筛选。结果显示,GLW多糖能够降低酒精损伤的肝癌细胞株HepG2细胞的死亡率。同时诱导HepG2细胞中SOD酶活性增加,MDA,ALT,AST酶活性降低。GLW蛋白多糖能够诱导HepG2细胞低密度脂蛋白受体LDLR的表达量增加。建议GLW蛋白多糖具有调节胆固醇的转运,促进低密度脂蛋白的降解的活性,同时具有肝细胞的保护作用。
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