本文以南瓜叶为原料,首先研究了水提取法、盐酸低温水解、盐酸高温水解、乙酸水解法对南瓜叶蛋白的分离效果,随后重点研究了分离产物的急性毒性和对高脂膳食小鼠血脂的调节作用,主要得到以下结论：(1)采用水提取法对南瓜鲜叶进行提取,通过提取温度、提取时间、料液比单因素试验发现对南瓜鲜叶的提取率较低,说明南瓜叶蛋白水溶性较差,因而放弃做进一步正交试验对提取条件进行优化。虽然这种水提物亦可能具有一定的开发潜力,但是受时间限制而暂时放弃了后续的毒性和降脂功能评价。(2)在盐酸低温水解方法研究中,通过单因素试验确定了盐酸浓度、料液比、水解时间、水解温度对南瓜叶蛋白水解溶出率的影响,并利用正交试验对其水解条件进行了优化试验。正交试验的结果表明优化工艺条件为盐酸浓度0.5mol/L料液比1：10、水解温度30℃、水解时间48h。通过这种方法制得的产品蛋白含量偏低,其蛋白含量为37.38%,其原因可能是南瓜叶中含有很多其它物质,如多酚、生物碱、色素、糖类等,所以在蛋白质水解的同时,其它物质也一同溶出来了导致最后得到的水解溶出物的蛋白含量低。成本低,低温或室温条件下容易操作是这种方法突出的优点,其不足之处是其产物的气味等感官性质与高温水解溶出物相比有差距。(3)用无水乙醇将南瓜叶中的多酚、生物碱等除去,再用热水将水溶性糖类等物质除掉,得到的南瓜叶蛋白含量达到40.34%,比原叶粉中蛋白含量28.19%高。因此,采用这种方法是生产浓缩蛋白质的好方法,同时也可将此方法运用于其它植物叶的加工(4)将乙醇加热水处理后的南瓜叶蛋白通过盐酸高温水解,其蛋白水解溶出率为84.53%,并且水解液具有很香的气味。预处理除杂后的南瓜叶经低温盐酸水解得到的水解溶出物蛋白含量为42.32%,与盐酸高温水解得到的水解溶出物蛋白含量为45.22%相比差别不大,并且两者的水解溶出率也相差不大,说明盐酸低温水解也是值得研究的。尽管盐酸低温水解溶出物可能具有很高的开发价值,但是受研究生实验室工作时间有限的限制,只能有所取舍,而暂时放弃了后续的对其提取物的毒性和降脂功能的评价工作。建议以后在条件允许的情况下,继续进行深入的研究。(5)通过单因素和正交试验确定乙酸水解南瓜叶蛋白的工艺参数为乙酸浓度10mol/L、料液比1：20、水解时间25h、水解温度110℃。在此条件下,获得的氨基酸溶出率为45.11mg/g,蛋白质的水解溶出率为74.59%,与盐酸高温水解相比,水解溶出率略低。这有可能是因为乙酸的酸性较弱,没有完全将蛋白质水解成氨基酸,而只是水解成了多肽,这也是导致氨基酸溶出率的测定值偏低的原因。通过水解溶出物成分测定,乙酸水解溶出物蛋白含量为51.27%,比盐酸高温水解溶出物的蛋白含量要高一些。虽然盐酸高温水解溶出物中存在有氯丙醇,但是经过简单的方法(如弱碱条件下低温蒸发)处理后氯丙醇含量在1mg/kg以下,达到我国行业标准规定的水平；另外,由于水解液中的氨基酸含量高,通过加适量的水进行调配,其氯丙醇的含量会降到远远低于行业标准规定的水平。(6)无论盐酸还是乙酸高温水解溶出物的小鼠经口急性毒性试验的LDso都大于15g/(kg.bw),属无毒级别。(7)对盐酸和乙酸高温水解溶出物的降血脂功能进行了研究,将它们作为受试剂,对昆明小鼠进行灌胃,4周后,测定了小鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量及AI值。试验结果表明,高脂模型组小鼠的血清TC、TG、LDL-C均显著高于正常组,HDL-C均显著低于正常组,说明高脂血症小鼠模型组造模成功。试验结果还显示,一定剂量的盐酸高温水解溶出物和乙酸高温水解溶出物具有一定的降血脂作用。