【摘 要】
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目的通过基于16S rDNA克隆文库技术分析骨关节炎患者关节内细菌群落的分布情况,初步探讨细菌在OA发病中的作用。方法选取26例于我院行关节置换术或关节镜手术的骨关节炎患者,
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目的通过基于16S rDNA克隆文库技术分析骨关节炎患者关节内细菌群落的分布情况,初步探讨细菌在OA发病中的作用。方法选取26例于我院行关节置换术或关节镜手术的骨关节炎患者,根据病情轻重分成重度组(n=20)和轻度组(n=6),比较两组血液学炎性指标及关节液炎症因子水平;术中抽取患者关节液样本,提取样本基因组DNA,通过PCR技术特异性扩增细菌16S rDNA片段;对其16S rDNA片段构建克隆文库并测序,测序结果与NCBI基因组数据库进行匹配,确定对应的细菌;结合末端限制性片段长度多态性分析技术,分析每个样本所含有的细菌种类,通过主成分分析比较两组间细菌群落构成存在的差异。结果血沉、高敏C反应蛋白和间质金属蛋白酶-9在两组间无统计学差异,重度组关节液中肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β浓度明显高于轻度组;26例患者的关节液样本均能PCR扩增出细菌16S rDNA目的片段;共有25种细菌序列可以与数据库现有序列相匹配,其中含量最多的三种菌分别属于Aquabacterium fontiphilum strain、不动杆菌属和痤疮丙权杆菌;主成分分析发现两组间细菌群落构成存在差异,重度组痤疮丙酸杆菌、食烷菌、Aggregatibacter aphrophilus strain和Alpha proteobacterium的相对含量较轻度组稍高,而轻度组无色脱氮杆菌和弧形茎菌的相对含量较重度组稍高。结论OA患者的关节内可能存在Aquabacterium fontiphilum strain、不动杆菌属和痤疮丙酸杆菌等多种细菌;这些细菌可能参与了OA的发展,导致症状突然加重或慢性迁延。
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