枳(Poncirus trifoliata (L.) Raf)是研究耐低温基因较为理想的材料。本研究是以实验室通过SSH(Suppression subtractive hybridization)筛选的一个低温响应基因1(?)trPRP为研究对象,对其抗寒方面的功能进行研究。本研究分析该基因在不同胁迫条件下的表达模式,并通过农菌介导的遗传转化方法将PtrPRP-RNAi转入枳来研究其抗寒功能。主要研究结果如下：1、PtrPRP基因在低温、干旱、外源ABA以及盐胁迫处理不同时间下的表达分析表明,PtrPRP能够被上述4种处理诱导表达,但不同处理下的表达水平有所不同,其中尤以低温最为显著。此外,分析表明PtrPRP在叶中的表达量最高,在根中的表达量最低。通过亚细胞定位预测及分析,发现PtrPRP定位在细胞膜上。2、通过农杆菌介导将PtrPRP-RNAi转入枳中,PCR共鉴定出阳性植株31株。选取其中的6个系和WT进行半定量分析,发现在51#、52#和54#中PtrPRP的表达明显低于野生型。将51#、52#和WT进行0℃低温处理,电导率和MDA含量比野生型高。DAB和NBT染色和定量测定结果显示,转基因系积累了更多的H202和超氧阴离子。处理后两个转基因系的表达水平和脯氨酸含量含量均低于WT。以上这些结果表明转PtrPRP-RNAi枳的抗寒能力比野生型低,从而说明该基因在抗寒中起着正向作用。