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目的:糖尿病是严重影响人群健康的慢性疾病,不仅给个体带来躯体和精神上的损害,还给个人、国家带来经济负担。目前,糖尿病的发病率呈现逐年升高的趋势,其中2型糖尿病占90%以上,胰岛beta细胞胰岛素合成分泌功能缺陷及数量减少是2型糖尿病发病的重要环节。胰岛beta细胞功能的维持主要与转录因子有关,最近,长非编码RNA(lncRNA)的出现为我们提供了新的思路。lncRNA是一类长度超过200nt的非编码RNA,不编码蛋白质,在多种层面调控基因的表达。lncRNA在多种生物学过程发挥作用,包括生长发育、胚胎分化、细胞增殖等过程。lncRNA的异常表达会导致多种疾病的发生,包括肿瘤、神经系统、血液系统疾病。新近研究报道指出,lncRNA在糖尿病人的胰岛中异常表达,表明lncRNA与糖尿病的发生有关。Lincpint(Trp53 induced transcript)首先发现与小鼠的生长发育有关,敲除后出现生长受限。而Lincpint与糖尿病或胰岛功能的关系尚未见报道。本研究旨在细胞及活体水平,初步探讨Lincpint在胰岛细胞功能中的作用,丰富和完善lncRNA对糖尿病的调控作用。方法:通过实时定量PCR(real-time RT-PCR)检测Lincpint在Balb/c小鼠不同组织及二型糖尿病小鼠(diabetes mouse,db/db)胰岛中的表达水平。棕榈酸盐(Palmitate)处理MIN6细胞后,qRT-PCR检测Lincpint的表达。不同糖浓度处理MIN6细胞后,qRT-PCR检测Lincpint的表达。在细胞系、原代胰岛及活体动物水平,通过特异性的小RNA干扰实验下调Lincpint的表达。利用噻唑蓝(MTT)、流式细胞术、放射免疫分析法(Radioimmunoassay,RIA)、免疫印迹(western blot)等技术检测细胞增殖凋亡及胰岛素合成和分泌的变化。活体动物水平进一步通过腹腔注射葡萄糖耐受实验(Intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)、酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)及real-time RT-PCR技术检测胰岛素的合成和分泌能力。通过核质分离,RIP实验(RNA Immunoprecipitation,RIP)检测 Lincpint 是否通过 Ezh2 发挥作用。结果:Lincpint在小鼠胰腺中相对高表达,主要定位于胰岛中。db/db小鼠胰岛中,Lincpint的表达出现显著下调。Palmitate引起Lincpint表达下调。Lincpint的表达受葡萄糖的调控。MIN6细胞中干扰Lincpint后,细胞活力下降,对细胞周期没有影响,但细胞凋亡增加,胰岛素的合成和分泌能力下降,Insl、Ins2的mRNA水平下降,Pdx-1,MafA Glut2 mRNA和蛋白水平下降。在NIT-1细胞及原代胰岛中干扰Lincpint后,Insl、Ins2及转录因子mRNA水平下调。活体水平结果显示,Lincpint干扰组小鼠葡萄糖耐受能力有轻微的损伤,胰岛素分泌能力下降,MafA,Pdx-1,Glut2的mRNA水平出现下调。在MIN6细胞中,Lincpint主要表达于细胞核,可以与Ezh2结合,干扰Ezh2后,转录因子mRNA和蛋白水平下调。结论:本课题组初步证实了 Lincpint可以通过参与胰岛素的合成和分泌及影响胰岛细胞的凋亡来维持成年小鼠胰岛功能,Lincpint的缺失可能导致beta细胞损伤,在T2DM模型db/db小鼠胰岛中,Lincpint的表达下调揭示Lincpint可能参与了 T2DM的发病过程,未来可作为糖尿病研究的新靶点。