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目的:急性肝衰竭病情危重、病死率极高,目前仍是临床危重症,除了人工肝替代治疗、肝移植外,尚缺乏临床治疗特效药物,因此探究临床治疗药物非常必要。课题组前期研究发现人参皂苷Rg1(G-Rg1)对小鼠急性肝衰竭模型具有预防效果,且其可能与抗肝细胞凋亡和抗炎作用有关,但G-Rg1的具体作用机制、靶点仍不清楚,需要进一步研究。因此拟建立四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝衰竭小鼠模型,进一步研究G-Rg1对急性肝衰竭模型的作用机制,验证G-Rg1对ALF小鼠模型的有效性,初步探讨G-Rg1对CCl4诱导的ALF小鼠模型抗肝细胞凋亡的影响及相关机制。方法:采用随机数字法将40只健康成年C57/BL雄性小鼠分为生理盐水对照(NS)组,G-Rg1空白对照(G-Rg1)组,CCl4模型(CCl4)组,G-Rg1预防治疗(CCl4+G-Rg1)组。建模12h后采集各组小鼠血清和肝脏组织,用试剂盒法检测血清丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆红素(total bilirubin,Tbil)水平;HE染色评价肝脏组织病理学改变;定量PCR法检测肝脏葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP家族同源蛋白(CHOP)的表达量;Western blot检测GRP78、CHOP、半胱氨酸蛋白酶12(caspase12)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)的表达情况;免疫组织化学法分析GRP78、caspase3的表达情况;TUNEL法检测C57/BL小鼠肝脏组织细胞凋亡情况。结果:1.CCl4+G-Rg1组血清ALT、AST、TBil水平低于CCl4组,差异具有统计学意义(P<0.05)。NS组、G-Rg1组、CCl4组、CCl4+G-Rg1组ALT值分别为(50.12±9.25)U/L、(40.48±6.38)U/L、(980.66±110.29)U/L、(691.30±108.06)U/L;AST值分别为(9.69±2.78)U/L、(9.40±3.84)U/L、(319.44±89.32)U/L、(195.40±15.41)U/L;TBil值分别为(0.46±0.13)mg/d L、(0.48±0.08)mg/d L、(1.56±0.12)mg/d L、(1.09±0.11)mg/d L。2.模型构建完成后HE染色示CCl4组肝脏出现明显变性坏死并可见肝细胞坏死灶,呈典型的CCl4所致肝细胞病理表现。经G-Rg1预防治疗后的CCl4+G-Rg1组肝脏组织变性坏死程度较CCl4组明显减轻。3.CCl4+G-Rg1组GRP78、CHOP的m RNA相对表达量均较CCl4组下降,差异具有统计学意义(F=34.4、F=44.1,P<0.05)。4.Western bolt结果显示CCl4+G-Rg1组与CCl4组相比,caspase3、GRP78、caspase12、CHOP蛋白相对表达量均有不同程度降低,差异均有统计学意义(F=270.58、F=34.73、F=92.38、F=31.63,P<0.05)。5.免疫组织化学法检测GRP78、caspase3表达情况,光镜下观察结果显示CCl4组较NS组胞浆内棕黄色颗粒明显增多。CCl4+G-Rg1组较CCl4组胞浆内棕色颗粒减少。6.TUNEL结果显示CCl4+G-Rg1组棕色颗粒物质较CCl4组明显减少(F=330.9,P<0.05),提示G-Rg1预防治疗可以减轻CCl4引起的肝细胞凋亡。结论:G-Rg1预防用药可抑制CCl4诱导的小鼠急性肝衰竭的炎症反应,同时可减轻肝细胞坏死和凋亡。其作用机制可能通过抑制内质网应激相关信号分子,改善肝细胞内质网应激进而减轻肝细胞凋亡。结合课题组之前的研究结果提示G-Rg1可能通过多个作用靶点抑制肝脏炎症反应和肝细胞凋亡,实现保护肝脏功能作用。