【摘 要】
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植物光合膜上参与光反应的蛋白复合体主要有4种,分别是光系统II(PSII)、细胞色素b6f复合体、光系统I(PSI)和ATP合酶,其中PSII与PSI结合大量的色素分子(如叶绿素、类胡萝卜素等)并驱动了光能的吸收,传递与转化。PSI捕光天线LHCI由LHCA1、LHCA2、LHCA3、LHCA4四种天线蛋白组成,各结合一对特殊叶绿素分子(Chl a603-609),因为它们的吸收波长较长而被称为红
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植物光合膜上参与光反应的蛋白复合体主要有4种,分别是光系统II(PSII)、细胞色素b6f复合体、光系统I(PSI)和ATP合酶,其中PSII与PSI结合大量的色素分子(如叶绿素、类胡萝卜素等)并驱动了光能的吸收,传递与转化。PSI捕光天线LHCI由LHCA1、LHCA2、LHCA3、LHCA4四种天线蛋白组成,各结合一对特殊叶绿素分子(Chl a603-609),因为它们的吸收波长较长而被称为红移叶绿素(red Chls),它们可以使植物PSI-LHCI的捕光能力延伸到红外光谱区。PSI-LHCI中的4对红移叶绿素分子在能量传递途径中占据关键位置,对能量传递过程产生重大影响。四种LHCA天线蛋白中red Chls的红移程度并不相同,LHCA3和LHCA4的红移程度大于LHCA1和LHCA2,red Chls红移程度大小影响能量传递过程,因此研究影响red Chls发生红移的原因具有重要意义。基于早前体外实验的研究认为红移叶绿素Chl a603的配位氨基酸不同造成红移程度不同,LHCA1和LHCA2的配位氨基酸是组氨酸(His),LHCA3和LHCA4的配位氨基酸是天冬酰胺(Asn),Asn配位比His配位会导致更大程度的红移。本文以拟南芥为材料将LHCA1和LHCA2中的配位氨基酸His突变为Asn,测定转基因植株PSI-LHCI光吸收波长的红移情况,并分析LHCA天线缺失突变体的光合生理特征,为研究改变配位氨基酸后植株的生理特性奠定基础。本论文主要研究结果如下:(1)构建了LHCA1(H79N)、LHCA2(H99N)过表达载体,分别获得以拟南芥lhca1、lhca2突变体为背景的5株和6株转基因过表达植株。(2)利用低温荧光分光光度计(F-4700)测量LHCA1(H79N)、LHCA2(H99N)转基因过表达植株在440 nm处的荧光发射光谱。同野生型比较,捕光天线LHCA1和LHCA2中与红移叶绿素中配位的组氨酸His变为天冬酰胺Asn后,转基因过表达植株的吸收波长并未发生红移,而是发生了不同程度的蓝移,这与体外研究报道的结果不同。(3)为研究LHCA1(H79N)、LHCA2(H99N)转基因过表达植株的生理特征,首先开展了拟南芥LHCI天线突变体强光下的生理特性分析。研究发现相对于其他突变体材料而言,强光处理后lhca4突变体光合参数Fv/Fm、Y(I)、Y(II)、ETRI、ETRII和Vio含量下降的最快,Y(ND)和Zea积累量增长最快,强光下LHCA4的缺失对光系统造成的损伤大于其他天线缺失后产生的影响,说明了LHCA4基因在植物光保护中的重要性而LHCA4是红移程度最大的天线,红移叶绿素与光保护的关系有待进一步研究。
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