急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性髓系白血病(AML)的一个亚型(即AML-M3)，具有特征性的t(15：17)染色体易位并表达PML-RARa融合蛋白。APL的另一特征是在粒细胞发育过程中，细胞的分化被阻滞在早幼粒阶段，APL发病快而迅猛，是一种恶性白血病。本实验组的前期工作发现，亚硒酸钠可以诱导APL细胞株NB4发生凋亡，提示亚硒酸钠有可能成为一种治疗APL的新药物。为了进一步深入揭示亚硒酸钠诱导NB4发生凋亡的机制，我们从细胞水平和分子水平上，对此进行了研究。 在细胞水平上，本文采用了Annexin-V-FITC和PI双染实验检测了亚硒酸钠对NB4细胞的作用，发现PS外翻率最高可达到78.68％，同时还显示PS外翻率的变化与作用浓度和作用时间成正比，进一步说明了亚硒酸钠能够诱导NB4细胞出现凋亡。 为了比较硒的营养剂量和超营养剂量对NB4细胞影响的差异，我们选取了2umol/L和20umol/L这两个浓度，因为2umol/L处于硒的营养剂量范围，而20umol/L属于硒的超营养剂量范围，本文采用了CLONTECH公司的CLONTECH公司的AtlasTMHumanApoptosisArray(Cat.＃7743-1)对NB4细胞被2.0uM和20uM亚硒酸钠处理36小时的mRNA进行了分析。 前期的工作已经证实20uM亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡具有时间依赖性，为了深入研究其凋亡机制，本文采用了cDNAmicroarray对20uM亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡过程中多个时间点的NB4细胞基因表达谱的变化进行了分析。 本实验室发现亚硒酸钠能够诱导APL的NB4细胞发生凋亡，却不能够诱导其发生分化。同时还发现，如果将两者联合起来作用NB4细胞，亚硒酸钠和全反式维甲酸的作用浓度都大大的降低，同时能够诱导NB4分化和凋亡的同时发生。考虑到两者联合用药能够大大降低用药剂量，减少它们的毒副作用，同时还能够增强它们的疗效，本文开展了此方面的进一步研究。采用cDNAmicroarray对亚硒酸钠和全反式维甲酸联合作用NB4细胞后的基因表达谱的变化进行了分析，经过分析发现：5uM亚硒酸钠组表达上调的基因有61个，表达下调的基因有31个；全反式维甲酸作用组表达上调的基因有67个，表达下调的基因有27个；5uM和全反式维甲酸联合作用组表达上调的基因有63个，表达下调的基因有32个。同时还发现三个实验组的差异表达基因很不相同。5uM和全反式维甲酸联合作用组出现了与两者各自单独作用不同的基因表达变化情况：如多个周期素依赖性激酶抑制子cyclin-dependentkinaseinhibitor1C(p57，Kip2)、tumornecrosisfactor(ligand)superfamily,member10等基因的表达仅在联合组被上调。cyclinG1、mitogen-activatedproteinkinasekinasekinase14、E2Ftranscriptionfactor5，p130-binding等基因的表达仅在联合组被下调。 在前期的研究中发现，BAK基因和DAXX基因在20uM亚硒酸钠诱导的NB4细胞凋亡的过程中的表达被上调，提示它们可能在其中发挥重要作用。通过RNA干扰相关技术分别特异性抑制NB4细胞中BAK基因和DAXX基因的表达，证实BAK基因和DAXX基因在20uM亚硒酸钠诱导的NB4细胞凋亡的过程中可能起着重要的作用。