目的：外阴阴道念珠菌病是常见的外阴阴道炎症性皮肤病，机体对其免疫防御机制包括非特异性免疫和特异性免疫。非特异性免疫中阴道上皮细胞、吞噬细胞及正常菌群的拮抗作用等可延缓或抑制念珠菌的生长，而特异性免疫主要以T淋巴细胞介导的细胞免疫为主，体液免疫的保护作用则非常有限。 树突状细胞是体内最重要的抗原呈递细胞，具有强大的抗原吞噬能力，高表达MHC分子和共刺激分子，能够激活原始T淋巴细胞诱导初次免疫应答，在细胞免疫和体液免疫中都发挥着重要的作用。 本研究将临床分离的白念珠菌与外周血来源的树突状细胞共同培养，然后观察树突状细胞形态变化及检测其表面分子的表达，以探讨外阴阴道念珠菌病中树突状细胞的免疫学功能。 方法：第一、制备菌悬液：将患者阴道分泌物加入生理盐水中直接镜检，找到芽孢和菌丝者为念珠菌阳性，再将阳性的分泌物接种于科玛嘉念珠菌显色培养基，根据菌落颜色筛出白念珠菌，并做芽管形成试验进一步确定。用相同培养基转种3次，得纯化白念珠菌，最后用比浊管将其配成0.5麦氏浊度菌悬液。第二、树突状细胞的培养：取正常人抗凝外周血加到淋巴细胞分离液上，经梯度离心法获得单个核细胞。贴壁3h后去除非粘附细胞。将贴壁细胞在GM-CSF和IL-4诱导下，用含10％胎牛血清的RPMll640培养液培养，并且隔天换液一次。在培养的第6d，实验分对照组和实验组，实验组中加入不同剂量白念菌悬液作用于细胞，对照组加入同等量的无菌生理盐水，继续培养6h收集细胞。第三、实验过程中用倒置显微镜观察细胞形态变化并进行拍照。第四、加入PE标记的鼠抗人抗体CDS0、CD86标记各组细胞，用流式细胞仪测定DC表面标志CD80、CD86的表达。第五、统计学处理。结果：1.外周血DC细胞形态的观察：从外周血获得的单个核细胞，经贴壁培养3h后获得粘附细胞。将粘附细胞加入细胞因子培养24h可见有细胞聚集现象。第4d可见细胞大多呈悬浮生长并聚集成团，集落中的细胞边缘呈毛绒状。第6d可见细胞逐渐从聚集状态变为分散状态，镜下可看到细胞形态不规则，表面有大量的毛刺状突起，为典型的树突状细胞形态。对照组和实验组则未见差异。 2.科玛嘉念珠菌显色培养基分离培养念珠菌属：本试验共收集外阴阴道念珠菌病患者外阴阴道分泌物30份，经科玛嘉念珠菌显色培养基初筛并做芽管形成试验进一步确定后，获得白念珠菌23株，占76.7％、光滑念珠菌4株，占13.3％、克柔念珠菌2株，占6.7％、热带念珠菌1株，占3.3％。 3.流式细胞仪测细胞表面分子的表达：收集对照组和实验组DC，经流式细胞仪检测表面分子CD80、CD86的表达情况，结果显示：对照组DC中加入50 μ l无菌生理盐水刺激后为CD80(5.13％±0.48)、CD86(6.06％±0.82)；加入100 μ l无菌生理盐水刺激后为CD80(5.07％±0.51)、CD86(6.04％±0.95)；加入200 μ l无菌生理盐水刺激后为CD80(5.03％±0.52)、CD86(5.73％±0.93)。三者间没有显著性差异(P＞0.05)。实验组DC中加入50 μ l白念珠菌悬液刺激后为CD80(6.32％±0.49)、CD86(8.17％±0.86)；加入100 μ l白念珠菌悬液刺激后为CD80(7.37％±0.56)、CD86(10.47％±0.80)；加入200 μ l白念珠菌悬液刺激后为CD80(8.02％±0.44)、CD86(12.28％±0.78)，三者间有明显差异(P＜0.01)，实验组与对照组比较有显著性差异(P＜0.01)。结论：1.外阴阴阴道念珠菌病是妇科常见病，亦是常见的性传播疾病之一。发病率高且易复发，严重影响妇女身心健康。其病原菌分为白念珠菌和非白念珠菌(包括光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌等)。其中白念珠菌感染占主要地位。 2.外周血来源DC培养中加入细胞因子组合GM-CSF和IL-4后，再加入白念珠菌作为促成熟因子，共同培养6h，可获得具有典型形态的更加成熟DC. 3.流式细胞仪检测结果显示：经白念菌刺激后DC表面分子CD80、CD86的表达率明显上调，且与白念菌数量成正相关。提示DC可能通过上调表达表面分子CD80、CD86在外阴阴道念珠菌病中发挥其部分免疫学作用。