猪免疫球蛋白体外稳定性研究

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免疫球蛋白是机体受抗原刺激后发生免疫应答而产生的特异性球蛋白,在动物免疫中具有重要的作用。本论文研究了来自猪血液的免疫球蛋白(简称PIgG)的体外稳定性,主要研究结果如下: (1)在pH4.0~11.0范围内,PIgG十分稳定,pH<4.0或pH>11.0时,PIgG的稳定性下降。 (2)热变性动力学研究结果表明,在pH 7.4的磷酸盐缓冲液中,PIgG热变性的反应级数为1.1级。在60℃、65℃、70℃、75℃、80℃条件下,PIgG热变性的D值分别为833.33min、131.58min、37.04min、7.32min和2.54min,在此温度范围内PIgG热变性的Z值为7.96℃。PIgG热变性的表观活化能EA=284.45kJ/mol。当加热温度低于65℃时,PIgG比较稳定。 (3)蔗糖对PIgG的酸、碱变性及热变性均具有很好的保护作用,且保护效果随蔗糖浓度的提高而增强。 (4)在pH2.0的人工胃液消化体系中,由于酸变性PIgG全部水解;在pH3.0和pH4.0的人工胃液消化体系中,尽管检测不到所有的PIgG,但PIgG仍可与E.Coli特异性结合且凝集价未发生变化,表明在消化过程中具有抗原结合活性的F(ab′)2片段仍可完整地保留下来。 在pH7.4的人工肠液中,随着胰蛋白酶加量的增加和消化时间的延长,完整PIgG的存留率也逐渐减少。相对而言,胃酸造成的变性要较胰蛋白酶的水解对PIgG活性的影响更大。 (5)研究结果表明,PIgG粗制品及添加于全价饲料中的PIgG在室温和37℃条件下存放,PIgG是十分稳定的。
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