目的 本研究通过体外培养人眼小梁细胞，将地塞米松作为激素性处理因素，分子生物学方法检测体外培养的人眼小梁细胞紧密连接蛋白ZO-1和间隙连接蛋白Cx43表达的变化及Actin骨架形态结构的变化。旨在从新的角度解释房水流出阻力的调节机制，为GIG和POAG的发病机理的研究提供新的思路，为探讨其治疗措施提供新的方向。 方法 1.人眼小梁细胞的体外培养和鉴定：用组织块培养法培养正常人小梁细胞(NTM)及POAG患者小梁细胞(GTM)，传代培养永生化小梁细胞株(iHTM，加拿大Vincent Raymond教授惠赠)，显微镜观察、免疫细胞化学等方法鉴定小梁细胞。 2.激素处理小梁细胞：将细胞分为对照组和处理组，处理组细胞培养液添加10mol/L地塞米松进行培养观察细胞连接蛋白表达的改变，处理组细胞培养液添加5<*>10<-7>mol/L地塞米松进行培养观察细胞骨架形态变化。 3.小梁细胞ZO-1、Cx43蛋白表达的检测：应用免疫荧光细胞化学，RT-PCR、Westem blot方法分别从mRNA水平和蛋白水平检测小梁细胞ZO-1、Cx43的表达。 4.小梁细胞骨架形态的检测：应用免疫荧光细胞化学检测小梁细胞Actin骨架形态的改变。 结果 1.小梁细胞体外培养结果成功体外培养正常人眼、POAG患者及永生化小梁细胞，镜下可见：POAG患者与正常人，地塞米松处理组与对照组小梁细胞形态、分布上未见明显差别。 2.小梁细胞连接蛋白表达检测结果 1) 免疫荧光细胞化学结果显示Dex处理2天后，人眼小梁细胞ZO-1、Cx43蛋白分布无明显变化，均定位于相邻细胞边界； 2) RT-PCR结果显示各组小梁细胞在mRNA水平均有ZO-1、Cx43的表达；其中ZO-1存在两种亚型α+/α-，ZO-1α+比α-表达量少； 3) Westem blot结果显示各组小梁细胞在蛋白水平均有ZO-1、Cx43表达。 对于正常人眼小梁细胞，只检测到ZO-1一种亚型α-和Cx43表达。Dex处理4天时间内随着时间的延长各组细胞两种蛋白的表达均呈上升趋势，相同时间点地塞米松处理组两种蛋白的表达量明显较对照组高；Dex处理5天后，随着时间的延长各组细胞两种蛋白的表达均呈下降趋势，相同时间点地塞米松处理组两种蛋白的表达量明显较对照组低。 对于POAG患者小梁细胞，检测到ZO-1两种亚型α+/α-和Cx43表达。两种蛋白随着时间延长表达先呈上升趋势， Dex处理6天左右，随着时间的延长各组细胞两种蛋白的表达均呈下降趋势；相同时间点地塞米松处理组ZO-1a+和Cx43蛋白的表达量明显较对照组高。 3.小梁细胞骨架形态检测结果 1) 免疫荧光细胞化学结果显示正常人眼小梁细胞的DEX处理组可见CLANs结构形成而对照组未见此结构存在； 2) CLANs结构可见于未加Dex处理的GTM和iHTM小梁细胞，而DEX处理组CLANs结构形成明显增多。 2.ZO-1α+在GTM的表达可能与POAG患者小梁网部位房水流出阻力增加有关。 3.Dex可以诱导体外培养人眼小梁细胞Actin骨架重构形成CLANs结构，DEX可以改变紧密连接相关蛋白ZO-1和间隙连接蛋白Cx43的表达，可能在小梁网部位房水流出阻力调节中具有重要作用。