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目的
通过观察黄芪建中汤对胃溃疡大鼠治疗作用及其对大鼠血液和组织中TGF-α和CGRP表达的影响并通过评价再生粘膜组织学成熟度来分析探讨其影响大鼠溃疡愈合质量的部分机制。
方法
选取清洁级健康雄性SD大鼠60只,体重180±20g,按照随机数字表法分为正常组12只和模型组48只,模型组48只大鼠按照文献[12]方法一次性造模。造模后6日(理论上模型溃疡完全形成),从48只模型大鼠随机抽取12只处死以评价模型复制成功与否(分别从肉眼观察和组织病理学两方面确认)。余下36只再次按随机数字表法分为对照组、中药组和西药组,每组12只。余下的四组大鼠进入实验并于造模后第7日开始给药。用药剂量以60kg标准成人每日用量按《医用试验动物学》中“动物与人体的每公斤体重计量折算系数表”折算,中药组灌服黄芪建中汤4ml.0.2kg-1.d-1(浓度1g.ml-1),西药组灌服硫糖铝混悬液4ml.0.2kg-1.d-1(原药浓度以纯水稀释为104mg.ml-1),正常组和对照组灌服等量的生理盐水,共3周。分别于用药后7日和21日处死各组1/2大鼠,应用ELISA和RIA测定血及组织中TGF-α和CGRP含量;取到溃疡灶并用免疫组织化学SP两步法标记CD34以计数新生毛细血管数量,同时借助高清晰病理图像分析仪计数再生粘膜厚度及再生腺体数量。
结果
1.各组大鼠组间血和组织中TGF-α和CGRP含量比较结果
用药7日和21日后,血清TGF-α以中药组最高,西药组次之,正常组最低(均P<0.01)。用药7日,组织TGF-α以中药组最高(P<0.01),西药组次之(P<0.01),正常组与对照组无差异(P=0.053);用药21日,中、西药组TGF-α(组织)含量显著高于其余两组,但两组间无差异(P>0.05)。用药7日和21日,血浆CGRP以中、西药组最高(P<0.01),但两组间无差异(P>0.05),西药组与对照组无差异(P=0.053);中药组CGRP(组织)含量最高(P<0.01),西药组次之,对照组显著高于正常组(P<0.01)。
2.各组大鼠组内血和组织中TGF-α和CGRP含量比较结果
除正常组大鼠血和组织中TGF-α和CGRP含量无变化外(P>0.05),余下各组大鼠用药7日后血中TGF-α和CGRP含量均显著高于用药21日(P<0.01)。
3.各组再生粘膜组织学成熟度比较结果
除正常组外,其他三组再生粘膜厚度均随治疗时间增加而渐渐变薄;单位面积中再生腺体数量也相应增加,腺体形状渐趋规则,囊状扩张腺体数量减少,腺体间结缔组织面积也随之变小;新生毛细血管数量逐渐减少,各组前后变化显著(P<0.01)。用药7日和21日时,中、西药组在再生粘膜厚度显著小于对照组(P<0.01)但远高于正常组(P<0.01);两组间在再生粘膜厚度和再生腺体数量上相比较无差异(P>0.05)。中药组新生毛细血管数量显著高于其他三组(P<0.01)。
结论
1.促进大鼠血和组织中TGF-α和CGRP表达,并提高再生粘膜组织学成熟度可能是黄芪建中汤提高溃疡愈合质量的重要机制之一
2.从本实验结果来看黄芪建中汤作为一种胃粘膜保护剂,其疗效优于硫糖铝