【摘 要】
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目的:本研究临床部分通过对纳入病例进行信息采集,分析基本信息及中医四诊资料,研究特发性肺纤维化患者的一般情况及中医证候要素,归纳证素分布规律,进而总结出临床常见证型,为本病的中医诊断提供一定参考。在对纳入病例的四诊资料进行分析后,进一步分析用药情况,总结用药规律,发现常用药物,为本病的中医辨证论治提供一定参考。动物实验部分研究临床常用药的单体黄芪甲苷对博来霉素诱导的肺纤维化大鼠的干预作用,探讨其是
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目的:本研究临床部分通过对纳入病例进行信息采集,分析基本信息及中医四诊资料,研究特发性肺纤维化患者的一般情况及中医证候要素,归纳证素分布规律,进而总结出临床常见证型,为本病的中医诊断提供一定参考。在对纳入病例的四诊资料进行分析后,进一步分析用药情况,总结用药规律,发现常用药物,为本病的中医辨证论治提供一定参考。动物实验部分研究临床常用药的单体黄芪甲苷对博来霉素诱导的肺纤维化大鼠的干预作用,探讨其是否通过ACE2-Ang（1-7）-Mas轴及其下游信号通路发挥作用,以期发现黄芪甲苷抑制肺纤维化的分子机制及作用靶点,为中医药多靶点治疗肺纤维化提供理论依据,并为本病的中医药治疗提供新的思路。方法:（1）临床研究:根据《特发性肺纤维化诊断临床实践指南》中肺纤维化的临床表现制定诊断、纳入、排除标准,根据《中医诊断学》《中医内科学》《证素辨证学》中的症状及证素设计中医证候调查表,根据诊疗资料使用Epidata 3.1软件对符合纳入标准的患者一般信息及四诊资料进行整理,使用Excel软件建立数据库并进行频数统计,使用SPSS 25软件进行聚类分析。同时对本研究纳入的患者处方进行收集,使用Excel软件建立数据库并进行频数统计,整理药物频次及分类。（2）实验研究:将48只SD大鼠随机平均分为6组,即空白组、模型组、吡非尼酮组（162mg/kg）、黄芪甲苷低剂量组（50mg/kg）、黄芪甲苷中剂量组（100mg/kg）、黄芪甲苷高剂量组（200mg/kg）,以博来霉素气管内滴注的方式建立大鼠肺纤维化模型,造模后分别用不同剂量黄芪甲苷及吡非尼酮连续灌胃28天,称取大鼠体重及肺重计算肺系数,取大鼠肺组织制作HE染色、Masson染色切片进行病理观察,碱水解法检测肺组织HYP的表达水平,Elisa法检测血清IL-6、TNF-α的表达水平,Elisa法检测肺组织ACE2、Ang（1-7）、AngⅡ的表达水平,Western blot法检测肺组织TGF-β1、p-ERK1/2、α-SMA、E-Cadherin的蛋白表达水平,RT-PCR法检测肺组织TGF-β1、ERK1、ERK2、α-SMA、E-Cadherin的m RNA表达水平。结果:（1）临床研究:（1）65名IPF患者中男性患者45名,女性患者20名;年龄分布在42岁-81岁之间,平均年龄（63.62±9.96）岁,年龄分布以60-69岁为最多;病程在1到3年最多,为28例;18名患者有吸烟史,其中16例为男性;肺功能检查表现出不同程度的限制性通气功能障碍、弥散功能障碍。（2）本病涉及病性证素9个,构成比由高到低依次为气虚证（47.69%）、痰证（40.00%）、阴虚证（32.31%）、寒证（26.15%）、阳虚证（23.08%）、血瘀证（20.00%）、热证（15.38%）、燥证（15.38%）、气滞证（13.85%）;涉及病位证素7个,构成比由高到低依次为肺（64.62%）、脾（35.38%）、肾（30.77%）、胃（18.46%）、心（16.92%）、肝（10.77%）、胆（9.23%）。（3）聚类分析可将证素聚为四类:肺、脾、气虚、阴虚、痰;肾、阳虚、寒;胃、心、血瘀、燥;肝、胆、气滞、热。（4）65个中药处方中,共出现药物53味,累及频次893次,剔除甘草（65次）,总频次828次,其中黄芪出现频次最高,达35次。（5）对上述除甘草外的52味中药进行分类,共得到16类中药,其中补气药出现频次最高,达130次。（2）实验研究:（1）黄芪甲苷减轻博来霉素诱导下的肺组织炎症渗出、肺泡结构改变及纤维化程度。（2）黄芪甲苷降低肺纤维化大鼠肺系数,降低血清中IL-6、TNF-α的表达水平,降低肺组织中HYP、AngⅡ、TGF-β1、p-ERK1/2、α-SMA的表达水平,上调肺组织中ACE2、Ang（1-7）、E-Cadherin的表达水平,降低肺组织TGF-β1 m RNA、ERK1 m RNA、ERK2 m RNA、α-SMA m RNA的表达,上调肺组织E-Cadherin m RNA的表达,呈剂量依赖性,与模型组相比差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论:（1）IPF的中医病位证素主要涉及:肺、脾、肾、心、胃;病性证素主要涉及气虚、痰、阳虚、血瘀、阴虚、气滞。（2）肺气虚是IPF主要中医证候。（3）补气药是IPF临床常用药,黄芪在补气药中应用频率最高。（4）黄芪甲苷能抑制博来霉素诱导的大鼠炎症反应及肺纤维化程度,其发挥作用可能是通过调控ACE2-Ang（1-7）-Mas轴,以及调节下游TGF-β1、ERK等信号通路中关键信号转导蛋白的表达、抑制肺组织EMT过程实现的。
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