核盘菌是一种重要的病原真菌,其寄主范围广泛,由其引起的作物菌核病可造成作物大幅度减产,带来巨大的经济损失。由于抗病品种难以培育,化学药剂抗药性产生,核盘菌防治困难,目前研究者们着力于此病害的生物防治。真菌病毒是一类侵染真菌并在真菌体内完成复制的病毒,广泛存在于真菌中。本实验室在核盘菌菌株AH98中发现了核盘菌单股负义链RNA病毒1（Ss N SRV-1）,这是在真菌中发现的首例负链RNA病毒。该病毒可引起核盘菌全面衰退（致病力几乎丧失、菌丝生长缓慢、不产生菌核）。Ss NSRV-1基因组全长10002nt,基因组上线性分布有6个非重叠的基因（ORF1-ORF6）。ORF5编码病毒的L蛋白,ORF2编码病毒的核衣壳蛋白,其他几个基因编码的蛋白功能目前未知。为了探究清楚Ss NSRV-1中致使核盘菌产生弱毒特性的关键基因,本研究以带毒菌株AH98为原始实验材料,以p CH-EF-1α载体质粒为基础分别构建6个基因的表达载体,通过农杆菌介导（ATMT）核盘菌转化的技术将各个基因整合到核盘菌菌株1980基因组中,在获得携带病毒基因的转化子后,通过分析转化子的生物学特性来鉴定Ss NSRV-1中致使核盘菌衰退的关键基因。研究结果对于探索负链病毒引起核盘菌衰退机制以及核盘菌的生物防治有着重要意义。成功构建ORF1、ORF2、ORF3、ORF4和ORF6的表达载体并转入核盘菌菌株1980。已获得的含ORF1、ORF2、ORF3、ORF4和ORF6的核盘菌转化子分别为11个、7个、11个、12个和9个,对获得的转化子进行PCR验证,RT-PCR结果发现转化子中ORF1、ORF2和ORF3的转录本出现了剪切情况,且不同的基因受到了不同程度的剪切,而这种情况在完整的病毒完整基因组存在时并未出现,分析剪切序列发现多为含有真核生物内含子序列特征的序列,推测外源基因整合到核盘菌基因组中在形成成熟m RNA时病毒基因中的某些序列被当做内含子剪切,也可能是核盘菌防御外源基因入侵的一种机制。通过对已验证的转化子致病力以及生长速度等生物学测定发现,所得到的的五个基因的转化子中均有弱致病力的转化子出现,ORF1和ORF2的转化子中弱致病力的转化子比例较高,分别是57%和54.5%,在其他基因转化子比例很低,猜测ORF1和ORF2可能是导致核盘菌衰退现象的关键基因。