背景B群链球菌（Group B streptococcus,GBS）又称无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）,属于条件致病菌,在免疫力降低的情况下引起女性宫内感染、产后感染等,对围产期女性及新生儿产生严重危害,临床筛查GBS尤显必要。目前检测GBS的方法虽然比较多,但免疫学和分子生物学方法因各种原因皆不适合基层单位使用,显色琼脂培养基存在较多的假阳性和假阴性问题,产橙色素法虽然特异性好,但灵敏度偏低,特别是存在不溶血即不产橙色素GBS天然漏检问题。目的以Todd-Hewitt肉汤为基础,提高产橙色素GBS培养基灵敏度,改良该培养基天然漏检不产橙色素的GBS问题,使用国产原材料研制新的GBS液体显色培养基并对其进行临床评价,以期获得具有较高灵敏度、特异性、经济性的产品,用于临床筛查GBS。方法1.以Todd-Hewitt肉汤完全培养基为基础筛,以3株GBS标准菌株、1株CAMP（Christie-Atkinson-Munch-Peterson）试验阴性的GBS临床株、11株不溶血的GBS临床及9株杂菌标准菌株为对象,通过系列单因子优选试验和正交试验及分析,选出GBS产橙色素株数最多产色最明显而杂菌生长最差的液体显色培养基（本研究）。2.通过液体显色培养基检测242株不同浓度GBS临床菌株菌液以及76株的杂菌菌液的检出率。进一步,通过菌浓度梯度稀释,检测GBS液体显色培养基的检测限（limit of detection LOD）。3.把九种不同拭子在1ml浓度10~4 CFU/ml GBS ATCC12386菌液浸泡0.5hr和2hr,再接种液体显色培养基,比较差异性。,4.选取某三甲医院260位妇科门诊患者及121位孕妇各取两套拭子,每套包括一个阴道拭子和一个直肠拭子,其中一套分别接种液体显色培养基,另一套拭子分别四区划线接种血琼脂平板作为参比方法,培养后挑选所有疑似菌落用MALDI-TOF-MS（matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry）进行细菌鉴定,只要有一个菌落鉴定为GBS,该标本结果即判为GBS阳性,没有一个菌落鉴定为GBS,该标本结果即判为GBS阴性。结果1.筛选出的液体显色培养基的配方如下:大豆蛋白胨10 g/L、牛心浸粉13.5 g/L、牛肝浸粉6.5 g/L、葡萄糖17 g/L、氯化钠2.0 g/L、磷酸氢二钠0.4 g/L、碳酸氢钠2.0g/L、绵羊血清1.0 ml/L、二甲基甲酰胺（dimethylformamide,DMF）0.05 ml/L、羟丙基β-环糊精1.25 g/L、盐酸半胱氨酸3.5 g/L、二甘氨酸碳酸氢钠0.8 g/L、L-鸟氨酸1.1 g/L、氯化血红素12 mg/L、氨曲南0.8 mg/L、4 mg/L两性霉素B、乳酸链球菌素5 mg/L、庆大霉素8 mg/L及萘啶酸15 mg/L,调节p H至8.2。2.首先,采用该液体显色培养基检测242株GBS临床菌株,浓度10~4CFU/ml的共检出241株,浓度10~3CFU/ml的共检出237株;液体显色培养基检测76株10~8CFU/ml的杂菌菌液,共有9株杂菌明显生长,但都不显橙色。其次,GBS液体显色培养基的LOD对GBS ATCC12386和GBS ATCC13813分别是10 CFU和100 CFU。3.有六种拭子无影响,但另外三种明显抑制GBS的生长,而且时间越长越明显。第四部分,液体显色培养基对筛查临床标本GBS的灵敏度为93.02%,特异性为100%,通过卡方检验分析显示与参比方法即传统的培养法之间差异不具有显著统计学意义（P＞0.05）。结论本研究中的液体显色培养基相对于参比方法能够快速准确的检测出B群链球菌,在基层医疗单位有较大的应用价值。