应用AP-PCR DNA指纹图分离非小细胞肺癌相关差异片段

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiwei5520
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肺癌的发生是一个基因突变和染色体重排累积的过程,因此,肿瘤组织与正常组织之间存在着差异。寻找和克隆突变基因对于了解肿瘤的发生发展机制具有重要意义。 本研究应用随机多态性DNA(Arbitrari ly primed PCR,AP-PCR)指纹图谱分析技术,对9例配对的肺癌组织及癌旁组织作基因差异分析,经低严格条件和严格条件下的两轮四十余个循环,将AP—PCR产物加样于2%琼脂糖凝胶电泳,结果显示在两例肿瘤标本中各有三个不同于正常组织的差异片段,经玻璃奶回收后克隆其中四个片段,并测序。序列分析发现四个片段长度均为429bp,与GenBank已知序列比较表明其与已知序列无同源性存在。但其中三个片段间的同源序列达99%以上,说明为相同的片段。以片段8Tdf1为探针行Southern杂交,发现九对基因组标本中的5例肿瘤组织呈现高信号。说明8Tdf虽然是一个功能未知的基因序列,它与非小细胞肺癌的发生发展可能存在一定的相关性,有待于进一步的功能性研究加以证实。
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