肿瘤血供对VX2肝癌模型氩氦冷冻效果影响的实验研究

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目的通过给予实验兔药物改变VX2肝脏肿瘤供血,观察肿瘤血供对兔VX2肝癌冷冻效果的影响。方法用瘤块种植法在50只新西兰大白兔肝脏左叶种植VX2肿瘤,将种植肿瘤成功的45只以随机数字法分为3组,每组15只,组A为给予三氧化二砷组,组B为给予肾上腺素组,组C为空白对照组。开腹下行肝脏肿瘤冷冻治疗,术前术后行CT灌注扫描,计算肿瘤组织冷冻前后的血流量(Blood Flow,BF)、血容量(Blood Volume,BV)和表面通透性(premeability of surface area product,PS)值,观察CT扫描上冷冻范围的大小,分析各灌注参数之间的差异性。冷冻后即刻处死实验兔,摘取肝脏,将冷冻组织一分为二,一半行氯化三苯基四氮唑(Triphyltetrazolium chloride,TTC)染色,观察酶组织染色冷冻的范围;一半行还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸心肌黄酶(nicotinamide adenine dinucleotide diaphorase,NADH-diaphorase)染色,观察冷冻后酶组织染色的病理表现。结果1.冷冻治疗后CT扫描,可见泠冻区域呈低密度影,边界清晰,各组平均最大冷冻直径分别为:组A为2.3±0.3cm,组B为0.9±0.2cm,组C为1.6±0.2cm(F=126.824,P<0.001,各组之间的两两比较差异均具有统计学意义,P<0.001)。2.TTC染色冷冻区域未见染色,周围区域为红色,平均最大未染色直径组A为2.1±0.2cm,组B为0.8±0.2cm,组C为1.5±0.2cm(F=132.738,P<0.001,各组之间的两两比较差异均具有统计学意义)。与CT扫描冷冻范围比较,各组平均直径数值均较低,差异有统计学意义,P<0.001。3.各组CT扫描灌注参数:(1)冷冻治疗前:组A、组B和组C的BF分别为26.57±6.45(ml/100g·min)/91.67±8.88(ml/100g·min)/63.75±8.29(ml/100g·min)(F值为253.646,P<0.001),组内分别两两比较差异均有统计学意义,P<0.001;BV值从组A至组C分别为8.42±3.56(ml/100g)/21.23±3.27(ml/100g)/14.68±3.42(ml/100g)(F值为52.653,P<0.001),三组内分别两两比较差异均有统计学意义,P<0.001;PS值从组A至组C分别为17.86±3.25(ml/100g·min)/23.86±2.96(ml/100g·min)/20.36±3.50(ml/100g·min)(F值为12.938,P<0.001),三组内分别两两比较差异均有统计学意义,P<0.001;(2)冷冻治疗后:组A、组B、组C的HF、BV及PS值分别为12.11±6.45(ml/100g·min)/14.09±2.79(ml/100g·min)/12.35±2.98(ml/100g·min)(F值为2.689,P>0.05)、3.31±1.25(ml/100g)/3.38±1.21(ml/100g)/3.57±1.32(ml/100g)(F值为0.168,P>0.05)、25.09±3.01(ml/100g·min)/26.84±1.92(ml/100g·min)/26.36±3.32(ml/100g·min)(F值为0.763,P>0.05)。三组各自术前术后参数值比较差异均有统计学意义,P<0.05。(3)冷冻后各组BF、BV值较冷冻前均降低,P<0.05,各组PS值冷冻后较冷冻前升高,P<0.05,差异有统计学意义。4.应用Pearson相关分析,BV和TTC染色冷冻直径相关系数为-0.787,P<0.001,呈负相关关系。5.NADH-diaphorase染色在冷冻区域均可见坏死区域、变性区域及正常区域。结论1.三氧化二砷明显降低肿瘤血供,肾上腺素明显增大肿瘤血供,随肿瘤血供增加,肿瘤血供与冷冻范围呈负相关关系。2.TTC染色可直观的反应肿瘤冷冻消融后组织内酶的活性变化,比CT扫描观察的冷冻结果范围较小,差异有统计学意义。3.冷冻后局部组织的血流量及血容量较冷冻治疗前均明显降低,毛细血管通透性增高;冷冻治疗后,不同肿瘤灌注量的冷冻区域血流量及血容量、血管通透性差异无统计学意义。4.CT灌注扫描可定量表达肿瘤血供及评价冷冻前后肿瘤血流灌注参数变化。5.NADH-diaphorase染色可以反映冷冻后即刻的组织活性。
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