红曲色素合成机理及红曲霉混合培养的初步研究

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本文围绕红曲色素的生物合成机理和混合培养对色素生物合成的影响进行研究。首先,采用刺激实验和静息细胞培养实验法来确定红曲色素的合成前体。考察了不同氨基酸和脂肪酸等对抗生素合成的影响,结果表明甘氨酸(5mmol·L-1)、缬氨酸(2mmol·L-1)、异亮氨酸(2mmol·L-1)、蛋氨酸(1mmol·L-1)、谷氨酸(2mmol·L-1)、精氨酸(1mmol·L-1)以及乙酸(2mmol·L-1)、丙酸(3mmol·L-1)等能够最大的刺激色素的生产,具有前体的作用。而且这些前体物质都具有转化为聚酮合成前体的共同特征。所以聚酮途径被认为是红曲色素合成的主要途径。为了证明红曲色素由聚酮合成,考察不同代谢途径的抑制剂对红曲色素合成的影响,结果表明莽草酸途径的抑制剂三甲胺(15mmol·L-1)和甲羟戊酸途径的抑制剂邻氨基苯甲酸(15mmol·L-1)及3,4-二羟苯甲酸(21mmol·L-1),对红曲色素的生物合成以及菌体生长没有影响;而许多聚酮合成关键酶的抑制剂对红曲色素的生物合成具有强烈的抑制作用,如β-酮酯酰-ACP合成酶专一性抑制剂碘乙酰胺、咪唑、硫酯酶抑制剂2,4-二硝基氟苯、甲基丙二酰异构酶的抑制剂Cu2+和Zn2+。其中碘乙酰胺的浓度为1mmol·L-1、咪唑浓度为1mmol·L-1、2,4-二硝基氟苯浓度为2mmol·L-1、Cu2+浓度为4mmol·L-1、Zn2+浓度为10mmol·L-1时就已经完全抑制色素合成。从而从正反两面都证明了红曲色素由聚酮途径合成。甲基转移酶抑制剂磺胺(200mg·L-1)对色素合成以及菌体生长没有影响,表明红曲色素中的甲基并非由甲基转移酶合成。研究了红曲霉与酵母菌和乳酸菌混合培养,由于酵母菌和乳酸菌生长迅速消耗了大量的营养物质,不利于红曲霉的生长和色素的分泌。但酵母菌和乳酸菌的代谢产物能促进红曲色素的合成。
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