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真核细胞翻译起始因子4E(Eukaryotic translation initiation factor4E,eIF4E)是mRNA翻译最有效的限速调节因子,对基因表达及蛋白质合成起始的调控作用有重要意义。最近研究发现,细胞内eIF4E的正常表达与否可影响细胞的增殖和分化,是一种与多种肿瘤的发生、浸润、转移有关的原癌基因。eIF4E在正常组织中呈低水平表达,当eIF4E呈过表达时,可通过调控肿瘤相关mRNA(涉及原癌基因激活、细胞凋亡、血管形成、侵袭转移等)翻译,使各种编码癌蛋白和促癌因子的mRNA翻译增强,促进肿瘤的发生和演进。越来越多的研究显示,在许多人类恶性肿瘤(如头颈部鳞癌、肺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胆管癌、结肠癌等)中,已发现eIF4E存在过表达,并且与肿瘤浸润和转移相关。
口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是口腔最常见的一种上皮细胞恶性肿瘤,约占所有口腔恶性肿瘤的90%。与许多恶性肿瘤一样,OSCC的发生与发展亦是受多种癌基因、细胞因子共同调节的结果。目前,对eIF4E在OSCC中的表达情况,以及其对OSCC临床病理特征和预后有何影响的相关研究甚少。本实验通过转录和翻译方式,分别从分子和蛋白水平检测了OSCC组织和癌旁正常粘膜组织中eIF4E的表达情况,并通过分析其与OSCC患者临床病理特征和预后的关系,揭示了eIF4E在OSCC组织表达的临床意义及预后的相关性,探讨了OSCC的发生发展探索新的分子机制。
目的:检测真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic initiation factor4E,eIF4E)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达情况,分析其与OSCC临床病理特征及预后的关系,探讨OSCC中eIF4E表达的临床意义及预后的相关性。
方法:选取2011年1月至2011年6月河北医科大学第四医院手术切除的原发性OSCC新鲜标本30例,并同时取癌旁正常粘膜组织作为对照。从2006年~2007年在河北医科大学第四医院口腔科手术治疗的,有完整临床病理及随访资料的原发性OSCC患者中,随机选取112例患者的肿瘤石蜡包埋组织,分别用RT-PCR法和Westem-blot法,检测30例OSCC新鲜标本和30例癌旁正常口腔粘膜组织标本中eIF4E的表达情况;用免疫组化S-P法,检测112例OSCC石蜡包埋组织和30例癌旁正常口腔粘膜组织标本中eIF4E的表达情况。所有数据应用spss13.0统计软件进行统计分析,用Log-Rank时序检验生存率差异,用COX比例风险模型进行多因素分析,探讨eIF4E表达情况与OSCC临床病理特征及预后的关系。
结果:
1.RT-PCR结果:eIF4E mRNA在OSCC组织和癌旁正常口腔粘膜中表达的相对光密度值(IDV)分别为:0.592±0.120和0.295±0.124,差异具有统计学意义(P<0.05)。高、中、低分化OSCC中eIF4E mRNA的表达量分别为:0.462±0.045、0.583±0.024和0.700±0.031,差异具有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移阳性组的表达为0.667±0.028,显著高于和淋巴结转移阴性组0.563±0.026,差异具有统计学意义(P<0.05)。而eIF4E mRNA在不同年龄、性别、肿瘤最长径、不同临床分期组中的表达差异无明显统计学意义(P>0.05)。
2.Western-blot结果:eIF4E蛋白在OSCC组织和癌旁口腔正常粘膜中表达的相对光密度值为0.633±0.020和0.350±0.021,差异具有统计学意义(P<0.05)。高、中、低分化OSCC中eIF4E蛋白的表达量分别为:0.460±0.032、0.627±0.013、0.767±0.029,差异具有统计学意义(P<0.05),且eIF4E蛋白表达量与分级呈正相关。有淋巴结转移组相对表达量为0.719±0.036,无淋巴结转移组相对表达量为0.602±0.020,前者明显高于后者,差异具有统计学意义(P<0.05)。
3.免疫组化结果:112例OSCC患者和30例口腔正常粘膜中eIF4E蛋白阳性表达率分别为63.7%、25.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。Spearman等级相关性分析结果显示,eIF4E蛋白表达随着分化程度降低呈上升趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。eIF4E蛋白在淋巴结转移组的高表达率(69.32%)明显高于淋巴结非转移组(45.34%),差异具有统计学意义(P<0.05)。eIF4E mRNA及蛋白的表达均与患者年龄、性别、淋巴结转移、临床分期无关,差异无统计学意义(P>0.05)。
4.Log-Rank生存分析显示,eIF4E蛋白低表达患者和高表达患者的5年生存率分别为63.9%和41.0%,二者存在显著统计学差异(P<0.05)。COX多因素分析结果显示,eIF4E蛋白高表达是影响OSCC患者预后的指标之一。
结论:eIF4E的高表达与OSCC的发生发展及不良预后密切相关,并可以作为判断OSCC恶性程度和预后的参考指标之一。