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玉米赤霉烯酮(ZEA)是主要由镰刀菌产生的霉菌毒素,ZEA具有类雌激素作用,可与子宫内雌激素受体不可逆结合,表现出生殖发育毒性,此外,ZEA还具有免疫毒性、致癌性、遗传毒性、细胞毒性和肝毒性,其中猪对其毒性最为敏感。研究目的：以体外培养的猪卵巢颗粒细胞为模型,通过研究ZEA对其毒性作用,来揭示ZEA对猪生殖系统的毒性作用,为找到其解毒方法提供一定的理论依据。研究方法：采用机械分离法从1-5mm的卵泡中提取猪卵巢颗粒细胞,Giemsa和结晶紫染色观察细胞形态,免疫细胞化学染色方法检测FSHR表达来鉴定颗粒细胞,MTT方法测定细胞生长曲线；于细胞对数生长期加入60,90和120μM的ZEA作用24h后,MTT法检测细胞增殖率,氮蓝四唑(NBT)显色法检测SOD活性,硫代巴比妥酸法测定细胞中MDA的含量,间接法检测细胞中GSH-Px活力,TUNEL和Annexin-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,分别用荧光探针DCFH-DA和罗丹明123进行活性氧和线粒体膜电位的检测,western blot检测Caspase-3,9蛋白含量,细胞免疫荧光方法测定Caspase-3蛋白的激活与定位以及Z-VAD-FMK及Ac-LEHD-FMK对细胞凋亡的抑制作用。结果：分离提取的猪卵巢颗粒细胞存活率为65%左右,细胞纯度>97%,且细胞生长状况良好,24h-96h为细胞的对数生长期。高剂量ZEA能抑制猪卵巢颗粒细胞增殖,其IC50为90μM; 60μM,90μM和120μM ZEA均极显著降低抗氧化酶SOD、GSH-Px活性,升高MDA的含量而引起细胞氧化损伤,呈剂量效应相关性；并呈剂量依赖性诱导细胞凋亡；研究揭示ZEA通过caspase依赖性的线粒体凋亡途径诱导猪卵巢颗粒细胞凋亡,主要表现在：极显著升高细胞内ROS水平,显著性降低线粒体膜电位,激活Caspase-3,9蛋白并诱导Caspase-3从细胞质进入细胞核执行功能,以及caspase抑制剂Z-VAD-FMK与caspase-9抑制剂Ac-LEHD-FMK显著性抑制ZEA所诱导的猪卵巢颗粒细胞凋亡结论：ZEA抑制猪卵巢颗粒细胞增殖,引起细胞氧化损伤,并经由caspase依赖性的线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。