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黑水缬草为败酱科(Valerianaceae)缬草属(Valeriana)植物黑水缬草(Valeriana amurensis Smir. ex Kom.)的干燥根及根茎。本实验课题组前期研究发现黑水缬草石油醚部位具有明显的改善睡眠的作用,经果蝇动物模型筛选出包括kissoone B在内的8个单体化合物具有显著的活性作用。本实验将在此基础上进一步深入研究kissoone B对野生黑腹果蝇睡眠的影响,并从分子水平探讨其睡眠机制。采用DAMS监测系统考察五个不同浓度(0.25%,0.5%,1%,2%,4%)及七个不同给药时长(1d,2d,3d,4d,5d,6d,7d) kissoone B对7日龄果蝇睡眠时间的影响；建立果蝇孤独模型,考察kissoone B单体化合物对其睡眠时间的影响,验证kissoone B改善睡眠的药理活性；运用RT-PCR技术,以果蝇脑部per、tim、clk、slo四种基因的表达量为指标,考察给予kissoone B前后7日龄果蝇睡眠相关基因相对表达量的变化。实验结果表明：1.不同浓度的kissoone B对7日龄果蝇睡眠时间的影响：不同浓度组与空白组比较,除0.25%浓度外,二者白天睡眠时间、夜晚睡眠时间及睡眠总时间均具有显著性差异(p<0.05)。2. kissoone B对给药1d-7d果蝇睡眠时间的影响：给药2天能显著增加雄性果蝇的睡眠时间(p<0.05),给药5天能极显著增加雄性果蝇的睡眠时间(p<0.01),且与给药2天组比较也具有显著性差异(p<0.05)。雌果蝇在给药第3天睡眠总时间与空白组,相比即显示出极显著性差异(p<0.01)。3. kissoone B对果蝇睡眠影响的量效、时效关系实验得出,雌果蝇的最佳给药浓度为0.5%,最佳给药时长为给药3天；雄果蝇1%药物浓度为最佳给药浓度,给药5天为最佳给药时长。4. kissoone B能显著延长孤独模型果蝇的睡眠时间。5.与空白组相比较,给予缬草石油醚提取物的果蝇per基因、tim基因、clk基因及slo基因表达量均上调; kissoone B化合物能使雌果蝇per基因、clk基因及slo基因表达量均上调,使雄果蝇的per、tim、elk及slo四个基因表达量都上调。上述实验表明,黑水缬草石油醚提取物及kissoone B单体化合物延长果蝇睡眠时间是以per.tim.slo和clk基因多基因参与的过程、多基因共同调节的结果。