【摘 要】
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目的:本实验旨在研究人脐带WJ-MSCs复合HA水凝胶修复兔膝关节软骨缺损的有效性及安全性,完善临床前阶段的动物实验,为未来利用干细胞疗法治疗人类膝关节软骨缺损提供一定的理论依据及参考价值。方法:12只雄性2.5-3.0kg新西兰大白兔,共24侧膝关节标本,随机选择每只的其中一侧作为实验组,另一侧作为对照组。利用4mm无菌环钻在兔双膝股骨滑车处制造软骨全层缺损模型（圆柱形,直径4mm,深1.5mm
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目的:本实验旨在研究人脐带WJ-MSCs复合HA水凝胶修复兔膝关节软骨缺损的有效性及安全性,完善临床前阶段的动物实验,为未来利用干细胞疗法治疗人类膝关节软骨缺损提供一定的理论依据及参考价值。方法:12只雄性2.5-3.0kg新西兰大白兔,共24侧膝关节标本,随机选择每只的其中一侧作为实验组,另一侧作为对照组。利用4mm无菌环钻在兔双膝股骨滑车处制造软骨全层缺损模型（圆柱形,直径4mm,深1.5mm）。将1ml的人脐带WJ-MSCs悬液（1×107个细胞）与浓度为4%的HA水凝胶充分混合形成复合物,将该复合物填充于实验组的软骨缺损处,对照组仅填充HA水凝胶,双膝关节自身对照。随机于术后3、6个月各处死6只兔子,通过大体观察、蕃红O染色、天狼猩红染色、Ⅱ型胶原免疫组化在宏观和组织学角度评估软骨修复效果,相关数据进行统计学分析。结果:1)术后3个月,大体观察:实验组和对照组软骨修复区域均有缺陷,但前者的缺损区域明显小于后者,且表面相对较光滑,色泽、与周围整合均优于对照膝,实验组ICRS评分优于对照组（分别为8.70±1.16、2.70±0.48）,具有统计学差异（P＜0.05）。病理学染色:与对照组相比,实验组可观察到类似于周围透明软骨的细胞结构与排列及细胞外基质,且胶原纤维多于对照组,表明缺损中央具有一些透明样软骨,实验组Wakitani评分优于对照组（分别为7.90±0.74、9.60±1.07）,具有统计学差异（P＜0.05）。II胶原免疫组化:实验组观察到II型胶原染色阳性区域多于对照组,免疫组化评分分别为1.50（1.00,1.50）、0.00（0.00,1.00）,实验组优于对照组,具有统计学意义（P＜0.05）。2)术后6个月,大体观察:实验组软骨修复区域表面与周围正常软骨平齐,对照组缺损仍较明显,且前者色泽、光滑度、与周围整合均优于后者,前者大体观接近周围正常软骨,实验组ICRS评分优于对照组（分别为9.70±1.34、3.80±0.79）,具有统计学差异（P＜0.05）。病理学染色:实验组软骨修复表面更加光滑平整,呈现透明状,与周围正常软骨接近,软骨细胞结构与排列良好,含有较多的透明软骨细胞外基质,胶原纤维阳性染色区域明显多于对照组,排列有一定规律,与天然软骨结构相似,实验组Wakitani评分优于对照组（分别为4.50±1.27、8.80±1.40）,具有统计学意义（P＜0.05）。II胶原免疫组化:实验组II型胶原染色阳性区域明显多于对照组,免疫组化评分分别为3.00（2.50,3.00）、1.00（0.00,1.00）,实验组优于对照组,具有统计学意义（P＜0.05）。结论:人脐带WJ-MSCs复合HA水凝胶对兔膝关节软骨缺损具有一定的软骨修复能力,且修复能力优于单纯HA水凝胶。
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