大鼠亚硫酸氧化酶活性及胸主动脉内源性SO2含量的研究

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二氧化硫是一种广泛存在的环境污染物。煤、石油等燃料的燃烧会产生SO2,许多工业和农业生产(如硫酸和纸浆生产、农药杀虫剂生产等)过程中SO2是不可缺少的原料或中间媒介,食品饮料工业中亚硫酸盐常被用作防腐剂、保色剂,在药物(如心血管药物、止吐药、抗生素、麻醉药等)中亚硫酸盐也有应用。机体自身代谢含硫氨基酸和其他含硫化合物也会产生亚硫酸盐。因此机体可通过呼吸、饮食、用药等途径摄入SO2,体内的SO2代谢转化为亚硫酸盐,经亚硫酸氧化酶的氧化作用,最终以硫酸盐的形式随尿排出。亚硫酸氧化酶活性强弱对评价SO2的毒性作用意义重大。  本文分析了亚硫酸氧化酶在大鼠体内的分布并初步研究了亚硫酸氧化酶随年龄的变化情况,旨在探讨不同脏器代谢SO2的能力及年龄对各种脏器中亚硫酸氧化酶活性的影响。以Wistar大鼠为实验材料,利用细胞色素c为电子受体,应用分光光度法测定了不同月龄(1、4、10个月)大鼠肝、肾、肺、脾、脑、胃及胸主动脉中亚硫酸氧化酶的活性。结果表明:⑴亚硫酸氧化酶在大鼠全身主要脏器中普遍存在,且在不同脏器中该酶的活性不同,从强到弱的顺序基本表现为:肝、肾>胃>脑>胸主动脉血管>肺>脾;⑵肝、肾、血管组织中亚硫酸氧化酶活性与大鼠年龄相关,肝脏亚硫酸氧化酶活性随年龄的增加而增加(Spearman等级相关,r=0.674,p<0.001),而肾脏和胸主动脉血管该酶活性随年龄的增加而减小(Spearman等级相关,r=-0.756,p<0.001; r=-0.629; p<0.05),其余脏器未见明显变化;⑶亚硫酸氧化酶活性降低可能是一种机体衰老的生化标志物。同时进行了高效液相色谱法测定大鼠胸主动脉血管内源性二氧化硫的含量。血管匀浆液经还原、衍生、蛋白沉淀、中和后,取上清液进入色谱仪检测。实验发现流动相采用甲醇/0.25%乙酸水/磷酸=30/70/0.01(v/v)可使目的峰峰形较好,且与干扰峰(尤其是与血管样品测定时目的峰前的杂峰)分离良好,保留时间在9min左右,柱效达10000左右。每次实验时只需调整所加磷酸的量(控制在100mL水中加10-15μl磷酸)即可,实验条件稳定。实验测得大鼠胸主动脉血管组织中SO2含量为2.21±1.57μM/g蛋白,范围在0.41-5.74μM/g蛋白。
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