CTX-M型鸡源大肠杆菌mcr-1基因的遗传特性

来源 :河南农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:tzhole
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
碳青霉烯类药物是兽医养殖业和临床医学中治疗由碳青霉烯耐药菌株引起的感染疾病的重要药物,最近几年来,随着抗生素的大量使用,导致耐药菌株不断增加,细菌的耐药性问题日益严重。因此选择抗多重耐药菌株的药物越来越有限。这就使得作为抗菌感染药物最后一道防线的黏菌素不得不重新启用。令人遗憾的是,大量关于黏菌素耐药的报道层出不穷,尤其是耐黏菌素基因mcr-1的出现,迅速引起了国内外学者的广泛关注。因此,研究mcr-1的传播流行及耐药机制显得尤为重要。本试验通过对不同年代CTX-M型鸡源大肠杆菌中黏菌素的耐药情况,及mcr-1基因的检出率进行统计分析,探索mcr-1基因的传播情况及耐药机制,为控制mcr-1基因在兽医临床上的进一步传播提供理论依据。药敏试验结果显示,2007年分离保存的13株CTX-M鸡大肠杆菌中,全部对黏菌素敏感,耐药率为0,其最小抑菌浓度(MIC)均小于0.5μg/mL。20122013年分离保存的66株CTX-M鸡大肠杆菌中有6株对黏菌素耐药,耐药率为9.1%,经PCR检测,这6株全部携带mcr-1基因,对黏菌素表现出不同程度的耐药。2016年分离获得的83株CTX-M鸡大肠杆菌中,耐黏菌素的有36株,耐药率为42.2%,PCR检测结果显示,有35株携带mcr-1基因,检出率为42.1%。通过质粒接合试验,41株同时产CTX-M基因和mcr-1基因的鸡大肠杆菌中,只转移CTX-M基因的接合子有29株,接合率为70.7%,CTX-M的接合频率范围为1.23×10-59.11×10-2。只转移mcr-1基因的接合子有14株,接合率为34.15%,mcr-1基因接合频率范围为3.78×10-54.24×10-1。同时转移CTX-M基因和mcr-1基因的接合子有14株,接合率为34.15%。菌株GZM6在含有头孢噻肟(16μg/mL)的LB肉汤中培养100代,保证每一代无菌操作不被污染,记为GZM6-100,分别提取GZM6和GZM6-100质粒,发现质粒能够在药物的反复筛选下稳定的存在,对GZM6-100的接合子PCR鉴定,发现CTX-M-9存在,而CTX-M-1消失,说明发生接合转移的基因为CTX-M-9,同时经过药敏试验检测,GZM6-100对头孢噻肟的MIC值(2560μg/mL)比GZM6的MIC(640μg/mL)提高了4倍。14株同时产CTX-M和mcr-1基因的鸡大肠杆菌及对应的接合子除了对黏菌素和三代头孢耐药外,对庆大霉素、阿米卡星、氟苯尼考、多西环素、恩诺沙星和喹乙醇也表现出不同的耐药性,且大部分菌株表现为多重耐药。说明除了这两个基因转移外,其他耐药基因也发生了转移。基因亚型的分析结果表明CTX-M-9亚型基因较多,CTX-M-1次之,发生接合转移的大部分是CTX-M-9基因。质粒不相容群结果表明,14株供体菌体内大部分有多个质粒类型,发生接合转移的FII型质粒较多。MLST结果显示,14株鸡源大肠杆菌一共获得11种ST号,表明大部分菌株亲缘关系比较远,有3种型号数据库中没有,已提交网站获取新的ST号。S1-PFGE和Southern blot杂交结果显示,原菌株中大多数含有多种类型的质粒,通过接合试验,接合子获得一到两个质粒,并且mcr-1基因位于其中一个质粒上,质粒大小在33.3kb310.1 kb之间不等,其中在菌株6、22、22J、24、24J、33、33J、G44和G44J中,mcr-1基因定位于78.2 kb的质粒上,为FII质粒,菌株6J的mcr-1位于244.4 kb处,菌株13J的mcr-1基因位于310.1 kb左右,菌株26未显色,分析mcr-1基因可能位于染色体上面。综上所述,不同年代分离的CTX-M型鸡大肠杆菌携带的mcr-1基因差异极显著,随着年代的增加而迅速增加。接合试验说明,CTX-M和mcr-1两基因都能通过质粒的接合而发生转移,水平传播占据主导地位。同时转移CTX-M和mcr-1两基因的供体菌及对应接合子除了对三代头孢和黏菌素耐药外,对庆大霉素、阿米卡星、恩诺沙星、多西环素、氟苯尼考、喹乙醇等药物也表现一定程度的耐药性,表现出多重耐药,说明在接合转移的过程中,与这些药物有关的耐药基因同时也发生了转移。S1-PFGE和Southern blot杂交表明mcr-1基因大多数位于质粒上面,由质粒介导并发生水平传播,且这些质粒大小有差异。
其他文献
利用已建成的负荷管理系统信道资源实现居民小区一户一表自动抄表是可行的、经济的,从而大大降低了工作人员的劳动强度。 It is feasible and economical to use the channe
近些年来,我国医务工作人员的继续教育工作已经得到了全面地开展,并且已经日趋完善,作为我国医务工作人员得到晋升重要的依据之一,继续教育的学分更多的受到了人们的关注,但
暖通空调系统在建筑节能中占据重要的位置,起这重要的作用,节能技术的研究开发和运用是暖通空调系统、建筑系统节能的基础,政府职能部门的重视和支持,则是实现大幅度节能、产
花境是花卉应用的一种主要形式.花境植物材料的丰富性及设计手法的多样性促使花境形成的景观效果几乎是无限的,因此,花镜植物的合理配置就成了花境设计中的重点和难点.
本文重点分析了城市规划设计与城市建筑设计的关系及各自的特点,并提出了实现二者协调发展的措施,以供参考.
传染性法氏囊病(IBD)是一种危害幼鸡的急性、高度接触性、病毒性传染病。传染性法氏囊病毒(IBDV)除引起3-6周龄易感鸡发生死亡外,可致雏鸡免疫抑制,导致鸡群对新城疫、马立克氏病
如今随着住宅小区建设的不断增加,暖通故障也时常出现,分析其原因,一方面是由于业主进驻后对暖通系统的私自改装,另一方面也有暖通工程施工过程质量不达标造成的.针对这样的
本论文通过介绍设计性实验教学的内容、教学特点,对培养学生的综合性作用和切实推进素质教育进行了阐述.
如果我是中央电视台或新华社记者,向那些体育界的名人通报姓名或许会随意些,提问题会更放开些。但是我不是。对地方报的记者来说,采访那些大牌明星机会相对比较少。但是,许多时候
犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)是Eugster于1977年从患出血性肠炎犬的粪便中新发现的一种小DNA病毒,属于细小病毒科(Parvoviridae)细小病毒属(Parvovirus)猫细小病毒亚群