秦岭细粘束孢(Leptographium qinlingensis)是导致华山松木材蓝变的关键病原菌,该菌与华山松大小蠹(Dendroctonus armandi)形成共生关系共同侵染华山松(Pinus armandi),使得寄主华山松树势衰弱,对我国秦岭地区的华山松造成重大经济损失。细胞色素P450酶是一类可以降解寄主树木产生的化学防御物质的代谢酶,在克服华山松抗性方面具有十分重要的作用。本研究利用形态学和分子生物学技术,对秦岭细粘束孢的分类地位进行鉴定,并对秦岭细粘束孢P450基因进行克隆分析,比较不同营养物质对秦岭细粘束孢生理的影响,以及华山松的主要挥发性萜类物质对秦岭细粘束孢P450基因表达水平的影响,旨在揭示秦岭细粘束孢P450酶对寄主华山松萜类物质的代谢机制,主要取得以下研究结果:(1)通过对秦岭细粘束孢菌丝结构的观察,ITS、TEF1、LSU、β-tubulin基因序列的系统发育分析,确定秦岭细粘束孢属于蛇口壳属的独立种。(2)以不同营养物质为培养基,秦岭细粘束孢在华山松韧皮部中的生长拐点比木质部的生长拐点滞后。其中以木质部和韧皮部为主要营养物质时,秦岭细粘束孢的纤维素酶活性无变化、过氧化物酶活性降低;以华山松木质部为主要营养物质时其漆酶活性显著升高。(3)根据转录组测序结果,设计目的基因特异性引物,共克隆出秦岭细粘束孢18条P450基因,经系统发育分析12条隶属于11个基因家族,分别为CYP5054、CYP5062、CYP51F1、CYP530、CYP533、CYP537、CYP539、CYP544、CYP570、CYP577、CYP617,其余6条基因与已知蓝变真菌P450基因家族无亲源关系。(4)对不同营养物质培养基下秦岭细粘束孢12条P450基因的表达进行定量分析,结果表明寄主华山松单萜混合物可以抑制8条基因表达,松节油可以抑制9条基因表达;CYP530、CYP5054家族基因能帮助降解寄主萜类物质。(5)对12条秦岭细粘束孢P450基因萜类物质的耐受性定量分析,结果表明萜类物质处理36 h后,CYP530、CYP539、CYP570、CYP533、CYP5054、CYP5062、CYP570家族基因和2条未知家族基因(p24、p6)对(±)α-Pinene、(+)-limonene表达有较强耐受性,单萜混合物和萜类混合物可降低耐受性。(6)萜类物质可抑制秦岭细粘束孢菌丝的生长,其中萜类混合物的影响最为显著,使秦岭细粘束孢的生长拐点最迟出现,而单萜混合物能有效降低孢子浓度。