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背景:原发性肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)发病率、死亡率分别占全球第六、第四位,东亚男性、女性肝癌发病率分别占世界第一、第二位。其发病初期症状不明显且恶性程度高,发现时常已处于中晚期,手术切除率已不足15%,愿意接受外科手术治疗的患者更不足20%。因此,早诊早治之于改善肝癌患者预后尤为重要。目前用于筛查肝癌的主要标志物为甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP),但甲胎蛋白低浓度患者常因不能有效检出而导致漏诊、误诊为肝实质占位病变(Space occuping lesion,SQL)。常见肿瘤标志物的联合诊断用于原发性肝癌是有效的尝试,例如AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ和GPC-3等,又因检测费用敏感不易被患者接受。研究发现热休克蛋白(Heat shock protein 70,HSP 70)与肿瘤发生、发展有关,但暂无血清及体液标本联合诊断相关研究。目的:研究热休克蛋白70在健康体检者、慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化及乙肝相关原发性肝癌患者血、尿标本中表达特征及诊断效用。方法:(1)运用酶联免疫双抗夹心法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)对25例健康体检者、24例慢性乙型病毒性肝炎患者、18例乙肝肝硬化患者及23例乙肝相关性原发性肝癌患者血、尿标本中表达水平进行检测。分析结果,计算灵敏度及特异度,并利用受试者工作特征(Receiver operating characteristic curve,ROC)曲线获取诊断临界值。(2)应用蛋白免疫印迹法(Western-Blot)对健康体检者、慢性乙型病毒肝炎患者、乙肝肝硬化患者及乙肝相关性原发性肝癌患者各6例的外周静脉血单个核细胞(Peripheral venous blood mononuclear cells,PBMC)中HSP 70表达水平进行检测,进一步分析HSP 70在PBMC中表达特征。结果:(1)肝癌组血清HSP 70水平明显高于健康体检者(P<0.001),整体比较具有明显差异(卡方值=35.57,P<0.001),HCC组与体检组组间比较具有统计学差异(P<0.001),血清HSP 70诊断HCC的ROC曲线下面积为0.811,当血清HSP 70含量为171.50 pg/ml时,约登指数达到最大,为0.594,其诊断HCC的灵敏度与特异度分别为0.714和0.880。血清HSP 70在慢性乙肝患者中表达最高,随病情进展逐渐降低。(2)肝癌组尿液uHSP 70水平明显低于健康体检者(P<0.001),整体比较具有明显差异(卡方值=47.58,P<0.001),HCC组与体检组组间比较有统计学差异(P<0.001),uHSP 70诊断HCC的ROC曲线下面积为AUC=0.029<0.5,预测价值较差。(3)HSP 70血/尿比值诊断HCC的ROC曲线下面积为0.934,当血清HSP 70与uHSP 70比值为2.55时,约登指数达到最大,为0.706,其诊断HCC的灵敏度与特异度分别为0.786和0.920。(4)HSP 70在乙肝肝硬化及肝癌患者PBMC中表达高于健康体检组及慢性乙肝组(P<0.05),组间比较具有明显差异(F=54.52,P<0.001)。结论:(1)HSP 70在肝癌患者血清中表达上调,具有较好的灵敏度和特异度。(2)HSP 70在肝癌患者尿液中表达下调,使用HSP 70血/尿比值与血清联合诊断时表现出较好的预测价值。(3)HSP 70在乙肝、肝硬化及肝癌患者PBMC中表达明显升高,与病理进展阶段相关。