富含环肽的精炼冷榨亚麻籽油的制备及环肽的消化吸收

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亚麻是常见的油料作物,在我国种植面积仅次于花生、油菜和大豆。亚麻籽油富含w-3多不饱和脂肪酸亚麻酸,同时含有亚麻环肽、植物甾醇、角鲨烯、生育酚等对人体有益的脂质伴随物。其中,亚麻环肽是常见于存在亚麻籽油中的一类疏水性环状肽,由八到九个氨基酸组成,具有免疫抑制、抗癌、抗炎等生物活性。目前,亚麻籽油提取方法主要有压榨法、水酶法、溶剂提取法,那么那种提油方法适合亚麻籽油加工?经过适度精炼可以去除光敏性色素、磷脂胶束、游离脂肪酸等成分,提高产品的外观色泽和储藏稳定性,亚麻籽油精炼对亚麻环肽有何影响?为了充分开发亚麻籽油,提高亚麻籽油的营养价值,本课题采用不同提油方法对亚麻籽油中营养成分进行对比,并研究亚麻籽油在精炼过程中环肽的变化,对亚麻籽油精炼工艺起指导作用,根据精炼过程中环肽的损失,从亚麻废白土中提取环肽,通过回填从而研发出一种富含环肽的亚麻籽油,并探究亚麻环肽的在体内体外消化吸收情况。主要研究结果如下:1、对比分析了溶剂提取法、热榨法、冷榨法和水酶法四种提油方法对亚麻籽油品质的影响。结果表明,压榨油中环肽总含量(冷榨油,504.04μg/g油;热榨油,631.41μg/g油)几乎是溶剂提取油和水酶法提取油的两倍,冷榨亚麻籽油的γ-生育酚含量较高(46.51 mg/100g油),但冷榨法的出油率仅为22.2%,低于水酶法得油率30.3%,并且水酶法提取的亚麻籽油中植物甾醇含量347.56mg/100g油高于压榨油。总体而言,冷榨亚麻籽油和水酶法提亚麻籽油的角鲨烯含量高,磷脂含量较低,油体呈淡黄色,无需精炼即可食用。总之,冷榨亚麻籽油可以作为亚麻环肽的良好来源,而水酶法提亚麻籽油可以保留更多的脂质伴随物,并具有高产油率。2、探究了亚麻籽油精炼(脱胶、脱酸、脱色、脱臭)对亚麻环肽的影响,并发现了一种快速从亚麻废白土中提取环肽的方法。结果表明,经过脱胶后,各种亚麻环肽的含量均有不同程度的损失,随着磷酸浓度越提高,总环肽的损失越多,并且在脱除的磷脂胶束中检测到环肽。不同浓度和不同种类的碱处理都会对使亚麻环肽损失,其中,加碱量越多,亚麻环肽的损失率越高,碱性越强,亚麻环肽的损失率越高。经过脱色之后,亚麻籽油颜色变浅,脱色对亚麻环肽脱除影响较大,脱色时间越长,环肽损失率越高,脱色50 min时,环肽已经未被检测到。脱臭工艺也会对亚麻环肽有影响,且随着脱臭温度升高,亚麻环肽脱除率降低。从精炼后的亚麻籽油废白土通过不同溶剂及其组合提取到了亚麻环肽,单一溶剂提取中,无水甲醇和95%乙醇对废白土中亚麻环肽的提取量最高,分别为2205.3μg/g土和2203.96μg/g土,混合组溶剂提取中,正己烷-95%乙醇提取的亚麻环肽总量为2929.98μg/g土。总而言之,油脂精炼会损失亚麻环肽,而精炼后的废白土是亚麻环肽的良好来源。3、采用适度精准加工,得到符合国家成品油标准的富含环肽的亚麻籽油。正交优化实验结果表明,酶法脱胶中加酶量为60 mg/kg,加水量2%(w/w),脱胶温度50℃,脱胶时间90 min,亚麻籽油脱磷率为78.84%,环肽保留率为74.91%。适度脱色实验中即活性白土活性炭比例为10:1,添加量0.5%(w/w),脱色温度75℃,脱色时间15 min。亚麻籽油脱磷率为29.87%,环肽保留率为89.6%。最后运用Matlab进行相似度评估,以CLB、CL(A+P)、CLO为组成亚麻环肽的主要成分,回添了精炼损失的环肽,最终的亚麻籽成品油也符合国标要求的质量指标。这款富含环肽的适度精炼亚麻籽油,符合了“食用油精准适度加工”的理念。4、通过体外体内实验研究亚麻环肽的消化吸收特性。其中体外模拟胃肠消化结果表明,亚麻环肽不被胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解,在胃肠中稳定存在,而体外Caco-2细胞吸收实验表明,亚麻环肽总含量在Caco-2细胞吸收与时间呈依赖关系,在处理6 h、12 h、24 h,分别从中检测到8种环肽,主要为CLB、CL(A+P),总吸收率分别为0.92%、1.94%、5.41%。体内大鼠吸收实验结果发现,在大鼠血液中0.5 h、1.5 h、3 h、6 h通过LC-QTOF-MS均未检测到亚麻环肽的碎片离子峰,并且在灌胃6 h后大鼠肝脏中也未检测到亚麻环肽。综合体内体外实验,由于亚麻环肽的环状结构具有一定的构象约束作用,其构象相对线型肽有一定的稳定性,所以不被蛋白酶酶解,并且在体内可能会与某些载体蛋白结合,例如载脂蛋白,所以在提取血液中的亚麻环肽必须优化提取方法才可以了解亚麻环肽在体内存在形式。
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