【摘 要】
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研究目的:慢性脑低灌注（chronic cerebral hypoperfusion,CCH）是脑部血流灌注量持续降低的长期状态,使大脑缺血缺氧和代谢失衡,对缺血缺氧敏感的白质区易受到不可逆伤害,与阿尔兹海默病、血管性认知功能障碍等疾病相关。近年研究显示,神经炎症在CCH的白质病变及神经元损伤过程中发挥重要的作用。另有研究显示,IL-19作为炎症反应的重要细胞因子,在中风等脑损伤过程中起着重要的作
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研究目的:慢性脑低灌注（chronic cerebral hypoperfusion,CCH）是脑部血流灌注量持续降低的长期状态,使大脑缺血缺氧和代谢失衡,对缺血缺氧敏感的白质区易受到不可逆伤害,与阿尔兹海默病、血管性认知功能障碍等疾病相关。近年研究显示,神经炎症在CCH的白质病变及神经元损伤过程中发挥重要的作用。另有研究显示,IL-19作为炎症反应的重要细胞因子,在中风等脑损伤过程中起着重要的作用,但在CCH疾病中的表达与作用尚不清楚。因此本实验拟探讨IL-19在CCH中的作用特点和影响机制。研究方法:1.采集血管性认知功能障碍患者的血清标本,并检测IL-19的水平,结合Fazkas量表评分进行相关性分析。2.采用免疫印迹、免疫组化、免疫荧光等方法检测IL-19在CCH病程中的蛋白表达特点。3.制备野生型和IL-19敲除的CCH小鼠模型,进一步应用行为学、免疫印迹、免疫组化等多种实验方法,探讨IL-19在CCH病程中的作用机制。研究结果:1.对符合纳入标准的50例标本检测结果显示,与对照组（17例）相比,血管性认知障碍组（33例）血清中IL-19表达增加（P<0.05）,且血清IL-19水平与Fazekas评分存在正相关。2.蛋白免疫印迹结果显示:在1周、1月、2月、3月的4个时间点,与假手术组相比,CCH模型小鼠脑组织中IL-19蛋白表达上调（P<0.001）,具有显著统计学差异。3.Morris水迷宫检测发现:与假手术组相比,野生型CCH组小鼠逃避潜伏期延长,平台穿越次数减少（P<0.05）,提示CCH模型组小鼠的空间记忆能力受损;与野生型CCH组相比,IL-19敲除CCH组小鼠逃避潜伏期缩短,平台穿越次数增加（P<0.05）,提示IL-19基因敲除可改善CCH小鼠的空间记忆能力。4.Luxol Fast Blue染色结果和蛋白免疫印迹结果显示:与野生型CCH组小鼠相比,IL-19敲除CCH组白质区GST3蛋白表达升高（P<0.001）、髓鞘相关醣蛋白（MAG）表达升高（P<0.001）,髓鞘碱性蛋白（MBP）蛋白表达升高（P<0.01）,白质结构损伤明显减轻。5.免疫荧光和免疫组化染色结果显示:IL-19在星形胶质细胞和神经元中表达;与野生型CCH组小鼠相比,IL-19敲除CCH组小鼠的小胶质细胞和星形胶质细胞激活均明显减弱（P<0.05）,IL-19敲除CCH组小鼠神经元损伤明显减少（P<0.05）。研究结论:1.IL-19与血管性认知障碍患者白质损伤程度密切相关,参与了CCH的病理过程。2.降低星形胶质细胞和小胶质细胞的活化,减少神经元损伤可能是IL-19保护CCH中白质结构受损,减少神经损伤,改善CCH造成的空间记忆障碍的重要机制。
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