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二十一世纪,恶性肿瘤将成为威胁人类健康的第一杀手。随着分子生物学、免疫学以及基因技术的不断发展,肿瘤疫苗已经成为一种治疗恶性肿瘤的重要方法。本研究针对DNA疫苗在恶性肿瘤治疗中展现出来的优势,在真核表达载体pVAXl的基础之上,引入了内部核糖体进入位点(IRES)元件,从而构建成功了一种新型 DNA 疫苗载体pVAXl-IRES。结果显示:在pVAXl-IRES载体中,IRES序列的上游和下游不仅可以分别表达,而且可以同时表达两种不同的外源目的基因。本研究进一步表明,在载体pVAXl-IRES中,IRES上游基因的表达强于下游基因的表达。
同时,本研究鉴于塞姆利基森林病毒(SFV)具有“自主复制”的功能,所以在构建好的DNA载体pVAXl-IRES的基础之上,又引入了pSFVl载体的复制酶编码基因nsPl-4,从而构建成了新型复制型DNA疫苗载体pSFVaxl-IRES。该载体不仅能够同时表达两种外源基因,而且由于引入了复制酶基因,使得该载体在细胞质中可以进行大量自我复制,因此外源基因可以得到高效表达。
这两种新型载体的构建,为研制新型肿瘤疫苗提供了良好的工具。