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背景与目的：世界卫生组织统计,全世界约有3%的人感染丙型肝炎病毒(HCV),约1.7亿的慢性携带者有发展成肝硬化和肝细胞癌(HCC)的危险性。丙型肝炎的防治是目前全世界面临的一项重大问题,由于HCV极易发生变异,使得其防治更为困难。至今尚无理想的抗HCV药物和疫苗防治HCV感染,特别是感染细胞内的HCV难以清除,成为丙型肝炎复发的病毒来源。本课题组前期体内外实验表明：丙型肝炎病毒的核心蛋白可以特异性的结合并激活2’-5’寡腺苷酸合成酶(OAS)启动子调控的重组caspase-3质粒系统,从而诱导HCV感染的肝细胞凋亡。干扰素是目前治疗丙型肝炎的常用药物之一,日本学者Kerr等发现用干扰素作用细胞,可在其细胞提取液中找到2’-5’寡腺苷酸合成酶。本研究旨在明确干扰素a-2b能否特异性的激活OAS启动子调控的重组caspase-3质粒,为OAS-re-caspase-3治疗系统进一步应用提供实验依据。方法：(1)构建重组质粒GV230/EGFP-OAS-re-caspase-3,PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳及扩增产物测序验证；(2)建立稳定转染细胞系:HL7702/EGFP-OAS-re-caspase-3和HepG2/EGFP-OAS-re-caspase-3(3)用流式细胞仪和MTT检测比较HL7702/OAS-re-caspase-3和HL7702/EGFP细胞在不同浓度干扰素作用下的凋亡情况；结晶紫染色及TUNEL检测比较HepG2/EGFP-OAS-re-caspase-3和HepG2两组细胞在不同浓度干扰素作用下的凋亡指数；(4)裸鼠成瘤：将稳定转染的HepG2/EGFP-OAS-re-caspase-3、HepG2细胞接种裸鼠皮下,待肿瘤形成后,瘤内注射治疗剂量干扰素,48小时后处死动物,TUNEL显色法检测比较两组细胞的凋亡指数。结果：(1)PCR及凝胶电泳和测序结果表明成功构建了重组质粒EGFP-OAS-re-caspase-3；(2)转染24h后,在荧光显微镜下观察计数,EGFP-OAS-re-caspase-3、EGFP质粒转染HL7702、HepG2细胞,转染效率达70%以上；G418筛选2周左右可见抗性克隆,维持筛选出稳定转染细胞株；(3)流式细胞仪、MTT、结晶紫染色及TUNEL体外实验表明：干扰素α-2b可特异激活OAS-re-caspase-3系统,引起转染GV230/EGFP-OAS-re-caspase-3质粒的细胞凋亡,且随着干扰素浓度的递增,凋亡指数依次递增,呈现剂量依赖关系(P<0.05)；而转染EGFP的对照组细胞,在不同浓度干扰素作用下,细胞凋亡指数差别不明显(P>0.05);(4)裸鼠成瘤实验结果：成功构建裸鼠皮下肝癌移植瘤模型,成瘤率100%,但HepG2/EGFP-OAS-re-caspase-3组肿瘤体积明显小于HepG2组(P<0.05):TUNEL技术检测比较HepG2/EGFP-OAS-re-caspase-3组和HepG2组细胞的凋亡指数,经统计分析得出HepG2/EGFP-OAS-re-caspase-3组的凋亡指数较HepG2组明显增高(P<0.05)结论：1.干扰素a-2b在体内外均能特异性地诱导转染EGFP-OAS-re-caspase-3质粒的肝细胞凋亡；2.在一定范围内随着干扰素浓度的增加,转染EGFP-OAS-re-caspase-3质粒的肝细胞凋亡率依次递增,呈现剂量依赖关系；3.干扰素有可能增强OAS-re-caspase-3系统治疗丙型肝炎的性能。