背景:癌症是全球人类第二大死因,2018年估计有960万人死亡,约六分之一的死亡是由癌症造成的。在全球绝大多数国家,乳腺癌的发病率和死亡率均居女性癌症的首位。2010年癌症经济成本高达1.16万亿美元。骨涎蛋白（Bone sialoprotein,BSP）,一个重要骨细胞外基质非胶原糖基化磷蛋白,过表达于许多恶性组织包括乳腺癌、前列腺癌、肺癌、甲状腺癌和黑色素瘤等,参与血管生成和肿瘤细胞粘附、增殖、迁移、侵袭、逃避宿主免疫防御以及转移。可是这些作用的具体分子机制尚未明确。目的:明确乳腺癌中BSP相互作用蛋白质,为预防和治疗BSP相关癌症提供重要依据。方法:利用阴离子交换DE-52、HPLC凝胶色谱柱TSK gel G3000SW、羟基磷灰石柱子以及C4反相HPLC柱子,从牛骨纯化BSP,通过共价键将其偶联Dynabeads?M-450 Tosylactivated磁珠上,再与人乳腺癌细胞系MDA-MB-231（MDA）细胞进行孵育,以双硫键固定BSP相互作用蛋白质,纯化和利用LC-MS/MS分析这些蛋白质。并且进行蛋白质-蛋白质相互作用分子网络、基因本体和通路分析。结果:从牛骨纯化1个单一蛋白质,LC-MS/MS鉴定为BSP。蛋白质组学分析显示MDA细胞中有511个BSP相互作用蛋白。Mascot肽段得分高前50个蛋白质经过STRING数据库处理分析后,形成一个由有3个小网络组成的分子网络。在这3个小网络之间甘油醛-3-磷酸脱氢酶发挥“桥梁”作用。基因本体和通路分析显示这50个蛋白中i)大多数为细胞或细胞器的成分;ii)大多数具有结合或结构分子活性:iii)大多数参与细胞过程和代谢过程;iv)虽然没检测到整合素,但是检测到整合素信号通路等的存在。值得一提的是BSP与a2-HS糖蛋白,另一个细胞外基质蛋白质,发生相互作用。结论:本研究发现BSP相互作用MDA蛋白质有511个,Mascot肽段得分高前50个蛋白质形成一个由有3个小网络组成的分子网络。在这3个小网络之间甘油醛-3-磷酸脱氢酶发挥“桥梁”作用。这50个蛋白中i)大多数为细胞或细胞器的成分;ii)大多数具有结合或结构分子活性:iii)大多数参与细胞过程和代谢过程;iv)虽然没检测到整合素,但检测到整合素信号通路等的存在。BSP与α2-HS糖蛋白发生相互作用。