【摘 要】
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黑皮鸡枞菌(Termitomyces eurrhirzus),学名为二孢拟奥德蘑(Hymenopellis raphanipes),是一种营养丰富和具有药用价值的野生食药两用大型真菌,也是中国传统的药用真菌之一,含有多糖、多酚、皂苷等活性物质,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血糖和修复肝损伤等功效。目前,黑皮鸡枞菌的活性成分主要是从子实体中提取,存在生产周期长、工艺复杂等问题。本文利用采集的疑似野生黑
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黑皮鸡枞菌(Termitomyces eurrhirzus),学名为二孢拟奥德蘑(Hymenopellis raphanipes),是一种营养丰富和具有药用价值的野生食药两用大型真菌,也是中国传统的药用真菌之一,含有多糖、多酚、皂苷等活性物质,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血糖和修复肝损伤等功效。目前,黑皮鸡枞菌的活性成分主要是从子实体中提取,存在生产周期长、工艺复杂等问题。本文利用采集的疑似野生黑皮鸡枞菌子实体,采用组织分离法获得菌丝体培养物,通过形态学观察和ITS rDNA序列分析对菌种进行鉴定;采用单因素试验法研究了黑皮鸡枞菌液体发酵产胞外多糖适宜的培养基组成和发酵工艺条件,并利用响应面试验法对影响胞外多糖产量较大的因素进行了优化。主要研究结果如下:(1)采用组织分离法,从野外采集的疑似野生黑皮鸡枞菌子实体中获得纯种,命名为ZZJ-1。经菌落和菌丝体形态观察,结合ITS序列分析、系统发育树构建,将该菌株鉴定为黑皮鸡枞菌ZZJ-1(Termitomyces eurrhirzus ZZJ-1)。(2)采用单因素试验法研究了液体深层发酵培养基组成和发酵工艺条件对胞外多糖产量的影响。结果表明,适宜的发酵培养基组成为:麦芽糖6%、酵母提取粉1.5%、KH2PO4 0.1%、MgSO4.7H2O 0.05%、VB1 10 ppm/L;适宜的发酵工艺条件为:发酵温度30℃、培养基初始pH6.5、接种量6%(V/V)、种龄5 d、装液量150 mL/300 mL三角瓶、摇床转速170 r/min、发酵时间6 d。在此条件下,胞外多糖产量为647.27μg/mL。(3)在单因素试验结果的基础上,采用响应面试验法,分别对发酵培养基和发酵工艺条件进行了优化,并初步研究了胞外多糖的抗氧化活性。结果表明,优化后的发酵培养基组成为麦芽糖6.13%,酵母提取粉1.42%,KH2PO4 0.112%,MgSO4·7H2O 0.056%,VB1 10 ppm/L。在此条件下,测得胞外多糖平均产量为513.38μg/mL,与模型预测值相对误差为1.4720%;发酵工艺条件为:种龄122 h、装液量150 mL/300 mL三角瓶,发酵时间166 h。在此条件下,得到胞外多糖平均产量为671.57μg/mL,与模型预测值相对误差为1.78%。说明使用该回归模型可以较好地预测黑皮鸡枞菌液体发酵产胞外多糖的产量。此研究对黑皮鸡枞菌液体发酵产胞外多糖具有重要意义,并为深度开发黑皮鸡枞菌提供了新的思路,具有较好的应用价值。
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