银屑病(Psoriasis),是一种常见的以角质形成细胞过度增生、炎症细胞浸润和新生血管形成为主要病理改变的慢性炎症性皮肤病,是一种常见的慢性复发性皮肤病,典型皮损为鳞屑性红斑。因其缠绵难愈,复发率高,西药副作用大,医疗费用贵,严重影响着患者的生活质量。且随着工作压力的加大和环境因素的改变,银屑病的发病率呈现逐年上升的趋势。目的:本实验我们通过人重组表皮生长因子(rhEGF)刺激人角质形成细胞株(HaCaT细胞)过度增殖,研究大青叶提取物对过度增殖的HaCaT细胞的抑制增殖和促进凋亡的作用及其作用机制,观察大青叶通过线粒体介导的内源性途径诱导HaCat细胞凋亡过程,以探讨其在治疗银屑病过程中可能的作用机制。方法:常规培养细胞并用1Ong/ml人重组表皮生长因子(rhEGF)诱导角质形成细胞过度增殖。用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)观察大青叶提取物对HaCat细胞增殖的影响,流式细胞术检测线粒体跨膜电位(Δ Ψ m)的改变;用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测Cyt-c、Pro/Cleaved caspase-9、Bcl-xl的蛋白的表达情况。结果:(1)大青叶提取物在10 μ g/ml-80 μ g/ml浓度范围内均能抑制HaCaT细胞增殖(P<0.05),大青叶提取物的抑制作用随着浓度增加而增强,呈正相关。(2)根据MTT结果,取大青叶提取物浓度(0、20、40、60ug/ml)分别作用于细胞。随着浓度的增加,大青叶促使线粒体膜电位降低。(3)免疫蛋白印迹法检测结果显示,大青叶提取物在浓度为20μ g/ml,40μg/ml,60μg/ml时,Pro/Cleaved caspase-9、Bcl-xl的表达逐渐降低,线粒体内Cyt-c释放增加。结论:在一定范围内随着浓度的增加,大青叶促使线粒体膜电位降低,下调Bcl-xl蛋白的表达,往胞浆内释放细胞色素C增多,激活Caspase家族,Cleavedcaspase-9表达增加。我们的研究结果表明,大青叶通过线粒体介导的内源性途径强效诱导HaCat细胞凋亡,是其治疗银屑病的一种可能性机制。