耐药性癫痫患者外周血Cdc42、N-WASP、Arp2/3基因及其蛋白表达的研究

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目的:通过检测细胞分裂周期42 GTP结合蛋白(Cell Division Cycle 42 GTP-binding protein,Cdc42)、神经元威斯科特-奥德里奇综合征蛋白(Neural Wiskott-Aldrich Syndrome Protein,N-WASP)、肌动蛋白相关蛋白2/3复合体(Actin-Related Protein 2/3,Arp2/3)基因及其蛋白在耐药性癫痫(Drug Resistant Epilepsy,DRE)患者外周血中的表达,探讨其在耐药性癫痫发病机制中的作用,评估其作为外周血生物学指标预测耐药性癫痫发生的价值。方法:选取2016年10月至2018年10月在右江民族医学院附属医院神经内科住院或门诊就诊的特发性癫痫患者72例,根据2009年国际抗癫痫联盟(International League Against Epilepsy,ILAE)制定的DRE核心定义,分为耐药性癫痫组(32例)和抗癫痫药物控制良好组(40例),另选健康体检者32例作为正常对照组。采用实时荧光定量PCR(real-time RT-PCR,RT-qPCR)及蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)方法分别检测3组人群外周血中Cdc42、N-WASP、Arp2/3基因及其蛋白表达量,分析3组人群之间的差异。结合耐药性癫痫的常见危险因素,分析不同用药方式、不同病程及用药前不同癫痫发作频率对Cdc42、N-WASP、Arp2/3基因及其蛋白表达的影响。结果:(1)与抗癫痫药物控制良好组及正常组相比,耐药组Cdc42、N-WASP、Arp2/3基因及其蛋白表达水平明显升高,差异具有统计学意义(均P<0.05);与正常组相比,抗癫痫药物控制良好组Cdc42、N-WASP、Arp2/3基因及其蛋白表达水平明显升高,差异具有统计学意义(均P<0.05)。(2)不同用药方式之间比较:2种药物治疗无效组Cdc42、N-WASP、Arp2/3 mRNA及蛋白表达水平明显高于2种药物治疗有效组及单药治疗有效组,差异具有统计学意义(均P<0.05);2种药物治疗有效组Cdc42、N-WASP、Arp2/3 mRNA及蛋白表达水平高于单药治疗有效组,差异不具有统计学意义(均P>0.05)。(3)不同病程之间比较:病程≥5年组Cdc42、N-WASP、Arp2/3 mRNA及蛋白表达水平明显高于病程<5年组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。(4)不同用药前癫痫发作频率之间比较:用药前癫痫发作频率≥4次/月组Cdc42、N-WASP、Arp2/3 mRNA及蛋白表达表达水平明显高于用药前癫痫发作频率<4次/月组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:Cdc42、N-WASP、Arp2/3基因及其蛋白在耐药性癫痫患者外周血中表达量明显升高,并且在2种药物耐药者、病程长、发作频率高的癫痫患者中其表达更高,提示Cdc42、N-WASP、Arp2/3及其蛋白可能参与耐药性癫痫的发生与发展,其高表达可作为外周血生物学指标对预测耐药性癫痫的发生具有一定的预警价值。
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