前言 血管内皮细胞通过分泌和释放多种血管活性物质如内皮衍生舒张因子（endothelium derived relaxing factor，EDRF）等调节血管张力。现证实EDRF的化学本质就是一氧化氮（nitrite oxide，NO），集中代表正常的血管内皮功能。NO是由一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）催化L-精氨酸转化而来。血管内皮功能障碍特征性的表现为内皮细胞源性NO生成减少或活性减低，其生物学效应表现为血管内皮依赖性舒张（endothelium-dependent relaxation，EDR）功能的减弱或消失。年龄增长是内皮功能失调的一个独立危险因子。研究发现，随着增龄，体内肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system，RAS）尤其是局部血管组织RAS被过度激活。血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AngⅡ）是RAS激活的主要产物，可通过血管紧张素1型（AT₁）受体促进血管内皮功能不良，其机制可能与氧化应激有关。因此推测，通过AT₁受体拮抗剂洛沙坦（Losartan）阻断老龄RAS的激活，可能对血管内皮损伤起到保护与改善作用。目前国内外有关试验表明，洛沙坦能够逆转或改善血管内皮细胞功能障碍，但上述研究多限于高血压、动脉粥样硬化、糖尿病等领域，而洛沙坦能否改善老龄血管内皮功能障碍尚未见报道，而且是否与NO合成增加而改善其利用度有关也未见报道。本研究试图探讨洛沙坦对老龄血管内皮功能不良的保护与改善作用，并对其可能机制作进一步的探究，以期望为临床心血管疾病的早期预防提供新思路。 实验材料与方法 一、实验材料 1．实验动物 Wstar大鼠30只，其中成年组根一4月龄X老龄组K0－22月龄)及老龄用药组（20－22月龄，洛沙坦20mg／kgld）各10只，喂养8周。 2．主要试剂及药品 去甲肾上腺素、乙酸胆碱、硝普钢、洛沙坦、一氧化氮合酶测试盒、一氧化氮测试盒。 3．主要仪器 组织器官水浴系统、力位移换能器、台式自动平衡记录仪、多导生理记录仪、载波放大器、压力换能器、电动组织匀浆机、紫5卜可见光分光光度计。 二、实验方法 互．体循环压力测定 腹腔注射苯巴比妥钠忙0mg／kg)麻醉，切开颈前皮肤，分离颈总动脉，用充满 0．二％肝素化的 PE－50聚乙烯导管插人颈动脉，连接压力换能器，用多导生理记录仪测量并记录体循环压。 2．血管张力测定方法 采用组织器官水浴系统。体循环压力测定后，取出并分离降主动脉，剪成长约3－4mm的动脉环行血管张力测定；余段深冻保存，行主动脉NO生成量及NOS活力测定。将主动脉环悬于盛有20 mlml他化营养液的恒温槽内（＊H7．4。o．2，温度37．0土0．5℃），持续通予 95％的氧和 5％的二氧化碳混合气体。通过自动平衡记录仪记录血管环的张力变化。给予动脉环静止张力1．5克，平衡30分钟后用KrebS液冲洗3次，标本继续平衡30分钟，期间不断 ·二·调整静止张力使之保持在＊ 5克。血管环用去甲肾上腺2 X 10刁mol／L预收缩，达到最大收缩状态时，累积加人不同浓度的乙酸胆碱O－’－10”moUL人记录血管环的张力反应变化。加人硝普钠（10－’‘～ 10－‘mo＊L）的过程同上。 3．主动脉NO生成量及NOS活力的测定 1)主动脉NO生成量的测定 用硝酸还原酶法测定。低温下制备10％主动脉匀浆，离心取上清0．SInl检测。以双蒸水为空白管，100卜moUL KNO。为标准管，各管依次bM各种反应液，550urn比色，计算NO生成量。 2)主动脉NOS活力的测定 采用比色法测定。取已制备好的10％主动脉匀浆100gi检测。双蒸水做空白对照，依次加入各种反应液，530inn比色，计算总NOS及iNOS活力。 4．数据处理 采用SPSS10．0统计软件分析数据。全部数据以均数。标准差k。s)表示，两均数比较用 t检验。P＜0．05为差异显著性。 实验结果 一、大鼠体重、体循环压力的变化 喂养过程中有洛沙坦组一只大鼠死亡。洛沙坦组与对照组相比，体重、体循环压力无明显差异瞩＞o．05，表门。 二、老龄对血管反应性的影响 1．对NE引起的血管预收缩反应的影响 老龄组与成年组大鼠主动脉环对NE所引起的血管预收缩反应相似，分别为二．58土o．M克、二．50土o．37克（P＞o．仍）。 2．对主动脉环内皮依赖性舒张功能的影响 NE预收缩后，累积性加人10一10习mol／L Ach，可见到两组 ·3·大鼠主动脉环均产生剂量依赖性的血管舒张反应，老龄组与成年组相比，其血管环对ACh的舒张反应明显降低，两组的最大舒张反应分别为37．54土5．明访民．19土7．90阮（P＜0．01）（表2，图二）。 3．对主动脉环非内皮依赖性舒张功能的影响 NE预收缩后，累积性加人 10－‘’－10一mol／L SNP，老龄组及成年组对SNP引起的血管舒张反应相似，最大舒张反应分别为92．98土6．65畅、94．97土4．的防（P＞0．05）（表3，图2）。 三、洛沙坦对血