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为了研究铜绿假单胞菌gyrA基因及parC基因突变与其对氟诺酮类药物耐药的关系.该课题采用琼脂二倍释法测定临床分离的55株铜绿假单胞菌MIC值,从中筛选出1株敏感和8株耐药菌,以标准敏感菌株ATCC27853作为质控菌株.用聚合酶链反应(PCR)扩增gyrA基因及parC基因的喹诺酮耐药决定区(QRDR),扩增产物片段长度分别为351bp、397bp.用限制性内切酶SacⅡ消化gyrA PCR产物,同时对上述10株菌的gyrA基因及parC基因的喹诺酮决定区(QRDR)进行PCR-DNA直接测序分析.临床分离铜绿假单胞菌parC基因QRDR序列分析发现:R25、R42、R43、R44等4株耐药菌株在87位有TCG→TTG突变,该引起氨基酸Ser→Leu的改变.此4株菌均有gyrA基因突变的存在,未发现parC基因突变单独存在.同时具有gyrA基因及parC基因突变的菌株中,除R25外,R42、R43、R44的MIC值是单独具有gyrA突变菌株MIC值的2~16倍.与此同时,新发现在所有耐药菌株parC基因115位(GCT→GCG)有一静止突变,该突变未引起氨基酸的改变.此结果提示,gyrA基因及parC基因突变都可引起铜绿假单胞菌对氟喹诺酮类药物产生耐药,但以gyrA基因突变为主,合并parC基因突变可增加耐药程度.