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残留白血病是治疗缓解后白血病复发的根源，极大地束缚着白血病治疗学的进展。本文初步探讨白血病骨髓基质对残留白血病形成的作用机制。采用Dexter型骨髓培养体系形成骨髓基质细胞贴壁层，接种HL-60细胞共培养，用去甲氧基柔红霉素(IDA)处理后，应用光镜、电镜、流式细胞仪、酶联免疫吸附实验等技术，动态观察白血病骨髓基质细胞体外生长特点，检测基质细胞Fn、VCAM-1及骨髓基质细胞培养上清中IL-6、TNF-α表达水平，观察急性白血病骨髓基质对残留白血病形成的作用。主要实验结果如下：1.急性白血病骨髓基质细胞生长延迟，贴壁形成时间、小丛形成时间、集落形成时间和融合形成时间均明显晚于正常骨髓基质组(p<0.05)；CFU-F计数和VCAM-1表达水平均明显低于正常对照组(p<0.05)，Fn与正常对照组无显著性差异(p>0.05)；骨髓基质细胞培养上清液中IL-6、TNF-α含量明显高于正常对照组(p<0.05)。2.急性白血病骨髓基质贴壁层对HL-60细胞的促增殖作用强于正常对照组，诱导分化作用弱于正常骨髓基质组。3.急性白血病骨髓基质细胞对HL-60细胞的粘附力强于正常对照组。将HL-60细胞与骨髓基质细胞贴壁层共培养72h，取粘附的HL-60细胞作细胞周期分析，白血病基质中的HL-60细胞处于G0/G1期者占48.51%，正常骨髓基质中的HL-60细胞处于G0/G1期者占33.25%,二者存在显著性差异(p<0.05)。<WP=9>4.去甲氧基柔红霉素在一定范围内对HL-60细胞的杀伤作用呈剂量、时间依赖性。50ng/ml和75ng/ml的IDA作用72h几乎能杀灭96%的HL-60细胞，在与骨髓基质共培养的体系中，无论白血病基质或正常基质，白血病细胞活力均明显增强(p<0.05)；随着IDA剂量增加，白血病细胞活力呈下降趋势，25ng/mlIDA时，白血病细胞活力为52.1~71%，75ng/mlIDA时，白血病细胞活力为11.7~20.1%。当50ng/mlIDA孵育72h，白血病骨髓基质组的HL-60细胞活力为41.2%，正常基质组的HL-60细胞活力为33.9%，二者比较有显著性差异(p<0.05)。提示在化疗药物存在时，急性白血病骨髓基质细胞有维持HL-60细胞活性的作用。5.采用抗VCAM-1单抗处理白血病或正常骨髓基质细胞层后，加入HL-60细胞，50ng/mlIDA作用24h，与无单抗处理组比较，HL-60细胞活力分别由78%、70.2%降至39.47%、34.33%(p<0.05)，提示骨髓基质细胞是通过与HL-60细胞的相互粘附而发挥上述作用的。采用50ng/ml IDA与白血病基质细胞、正常基质细胞或单纯培养基孵育24h，IDA作用24h对HL-60细胞的杀伤效应相似(p>0.05)；但与相应未孵育组比较，IDA作用24h对HL-60细胞的杀伤效应均显著减弱(p<0.05)。提示骨髓基质细胞或基质细胞条件培养基并无灭活IDA的作用，IDA的体外孵育有一定的减弱药效的作用。6.扫描电镜观察，融合的骨髓基质细胞连接成片，交织成网。与白血病细胞接触的基质细胞呈扁平样生长，可见白血病细胞嵌于基质细胞间隙，呈团块样生长，部分白血病细胞迁徙至基质细胞深层，二者存在密切的位置关系。 以上结果显示，白血病骨髓基质有助于残留白血病的形成。