前言 胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,在我国人群中的发病率和死亡率均占第一位。胃癌的发生和发展是一个包含癌基因激活和抑癌基因失活,伴有端粒酶活化及遗传不稳定性的多基因、多阶段的复杂的过程。在这个过程中,基因的突变是重要的作用机制之一。 Eph(erythropoietin-producing hepatoma amplifled sequence)家族是人类基因组最大的酪氨酸蛋白激酶受体家族,有14种人类Eph受体酪氨酸激酶,在人体内具有重要的功能。有研究表明,EphB2基因在胃癌、乳腺癌等肿瘤中表达上升,说明EphB2与这些肿瘤的发生与演进有重要联系。但是,Huusko P等最近发现前列腺癌DU-145细胞系(一种来源于前列腺脑转移灶的细胞系)中EphB2基因发生突变并且存在等位基因缺失,而且在使用野生型EphB2基因转染DU-145前列腺癌细胞系后,癌症细胞形成无性系细胞的生长可以被抑制,提示野生型EphB2基因可能有抑制肿瘤发生的作用。目前,EphB2基因在肿瘤发生和演进的过程中发挥作用的分子机制尚不清楚。 变性高效液相色谱(Denaturing High Performance Liquid Chromatography,DHPLC)是一种新的高通量筛选DNA序列变异的技术。其原理是用离子对反向高效液相色谱法分离并检测异源双链。该方法具有自动化、快速、检出率高、检出DNA片段大小范围广等优点。目前这项技术已用于基因序列的比较、人类基因多态性及疾病相关性的研究。其重要特点有:1)快速分离DNA分子,一般进行基因突变检测,一个样品约需8.8分钟;2)自动化操作系统;3)准确测定DNA片段大小;4)基因突变检出率高达95-100%;5)经济、操作简便、PCR产物无须进行纯化处理即可用于突变检测。 我们希望使用变性高效液相色谱技术检测EphB2基因在胃癌中的突